Il-benefiċċji tal-mikroskopija multifoton tal-iskannjar bil-lejżer mtejba
Laser Scanning Multi-Photon Microscope huwa titjib kbir fil-mikroskopija ottika, prinċipalment fil-kapaċità li tosserva l-istruttura profonda ta 'ċelluli ħajjin u fissi u tessuti, u li tikseb strutturi ċari u li jaqtgħu b'ħafna saffi Z-plane, jiġifieri, flieli ottiċi, li minnhom struttura solida tridimensjonali tal-kampjun tista 'tiġi mibnija. Il-mikroskopija konfokali tuża sors tad-dawl tal-lejżer li huwa estiż biex jimla l-pjan fokali ta 'wara kollu tal-lenti oġġettiva, u mbagħad tgħaddi mis-sistema tal-lenti tal-lenti oġġettiva biex jikkonverġu f'tikek żgħar ħafna fuq il-pjan fokali tal-kampjun. Skont l-apertura numerika tal-lenti oġġettiva, id-daqs tad-dijametru tal-punt ta 'illuminazzjoni qawwi huwa madwar 0.25 ~ 0.8 μm u l-fond huwa madwar 0.5 ~ 1.5 μm. Id-daqs tal-punt konfokali huwa determinat mid-disinn tal-mikroskopju, il-wavelength tal-laser, il-karatteristiċi tal-lenti oġġettiva, l-issettjar tal-istat tal-unità tal-iskannjar u n-natura tal-kampjun. Il-mikroskopji tal-kamp għandhom firxa kbira ta 'illuminazzjoni u fond ta' illuminazzjoni, filwaqt li mikroskopji konfokali jikkonċentraw l-illuminazzjoni għal punt fokali wieħed fuq il-pjan fokali. L-aktar vantaġġ bażiku ta 'mikroskopju konfokali huwa l-abbiltà li tagħmel sezzjonijiet ottiċi fini ta' kampjuni fluworexxenti ħoxnin (sa 50 μm jew aktar), bi ħxuna ta 'sezzjonijiet ta' madwar 0.5 sa 1.5 μm. Serje ta' immaġini ta' sezzjoni ottika jistgħu jinkisbu billi l-kampjun jitmexxa 'l fuq u' l isfel bil-mutur stepper ta 'l-assi Z tal-mikroskopju. L-akkwist ta 'informazzjoni dwar l-immaġini huwa kkontrollat fl-ewwel pjan u ma jiġix imfixkel minn sinjali emessi minn postijiet oħra fuq il-kampjun. Wara li tneħħi l-effetti tal-fluworexxenza fl-isfond u żżid il-proporzjon tas-sinjal għall-istorbju, il-kuntrast u r-riżoluzzjoni tal-immaġni konfokali jitjiebu b'mod sinifikanti fuq immaġini ta 'fluworexxenza konvenzjonali illuminati fuq il-post. F'ħafna kampjuni, ħafna komponenti strutturali kkomplikati jingħaqdu flimkien biex jiffurmaw sistemi kumplessi, iżda ladarba jkunu jistgħu jiġu akkwistati biżżejjed sezzjonijiet ottiċi, nistgħu nibnuhom mill-ġdid fi tliet dimensjonijiet bl-użu ta 'softwer. Dan il-metodu sperimentali intuża ħafna fir-riċerka bijoloġika biex jiċċara r-relazzjonijiet strutturali u funzjonali kumplessi bejn ċelloli jew tessuti.
