Għarfien dwar il-Mikroskopija tal-Fworexxenza Konfokali
Il-prinċipju bażiku tal-mikroskopija tal-fluworexxenza konfokali: sors ta 'dawl punt huwa użat biex irradja l-kampjun, u post tad-dawl żgħir definit tajjeb huwa ffurmat fuq il-pjan fokali. komposti minn splitters. Ir-raġġ splitter jibgħat il-fluworexxenza direttament lid-ditekter. Hemm pinhole quddiem is-sors tad-dawl u d-ditekter, rispettivament imsejjaħ pinhole tal-illuminazzjoni u pinhole ta 'skoperta. Id-daqs ġeometriku tat-tnejn huwa l-istess, madwar 100-200nm; relattiv għall-post tad-dawl fuq il-pjan fokali, it-tnejn huma konjugati, jiġifieri, il-post tad-dawl jgħaddi minn serje ta 'lentijiet, u finalment jista' jiġi ffukat fuq il-pinhole tal-illuminazzjoni u l-pinhole ta 'skoperta fl-istess ħin. B'dan il-mod, id-dawl mill-pjan fokali jista 'jiġi konverġenti fl-ambitu tat-toqba ta' skoperta, filwaqt li d-dawl imxerred minn fuq jew taħt il-pjan fokali huwa mblukkat barra mit-toqba ta 'skoperta u ma jistax jiġi immaġni. Il-laser jiskenja l-kampjun punt b'punt, u t-tubu fotomultiplikatur wara li jiskopri l-pinhole jikseb ukoll l-immaġni konfokali tal-punt tad-dawl korrispondenti punt b'punt, li huwa kkonvertit f'sinjal diġitali u trasmess lill-kompjuter, u finalment aggregat f'ċar ċar. immaġni konfokali tal-pjan fokali kollu fuq l-iskrin.
Kull immaġni tal-pjan fokali hija fil-fatt cross-section ottika tal-kampjun, u din is-sezzjoni trasversali ottika dejjem għandha ċerta ħxuna, magħrufa wkoll bħala sezzjoni rqiqa ottika. Peress li l-intensità tad-dawl fil-punt fokali hija ħafna akbar minn dik fil-punt mhux fokali, u d-dawl tal-pjan mhux fokali huwa ffiltrat mill-pinhole, il-fond tal-kamp tas-sistema confocal huwa bejn wieħed u ieħor żero, u l-iskannjar tul iż-Z -assi jistgħu jirrealizzaw tomografija ottika, li jiffurmaw a Osserva s-sezzjoni ottika bidimensjonali fil-post iffukat tal-kampjun. Li tgħaqqad l-iskannjar tal-pjan XY (pjan fokali) ma 'l-iskannjar tal-assi Z (assi ottiku), l-immaġni tridimensjonali tal-kampjun tista' tinkiseb billi jakkumulaw immaġini bidimensjonali ta 'saffi kontinwi u pproċessati b'softwer tal-kompjuter speċjali.
