Introduzzjoni għal xi għarfien dwar mikroskopju ottiku
Strument jew apparat li jkabbar oġġett ċkejken jew parti ċkejkna ta 'oġġett b'ingrandiment għoli għall-osservazzjoni. Huwa użat ħafna fil-produzzjoni industrijali u agrikola u r-riċerka xjentifika. Il-bijoloġisti u l-ħaddiema mediċi wkoll jużaw ħafna mikroskopji fin-negozju tagħhom. B'mod wiesa' maqsum f'mikroskopji ottiċi u mikroskopji elettroniċi.
Mikroskopju ottiku huwa mikroskopju li juża dawl viżibbli bħala s-sors tad-dawl. Mikroskopji ottiċi ordinarji jistgħu jinqasmu f'żewġ partijiet: is-sistema ottika u l-apparat mekkaniku. Is-sistema ottika tinkludi prinċipalment eyepieces, lentijiet oġġettivi, kondensaturi, dijaframmi u sorsi tad-dawl. L-apparat mekkaniku jinkludi prinċipalment il-kanna tal-lenti, kolonna tal-mera, stadju, bażi tal-mera, kamin ta 'aġġustament tal-ħxuna u partijiet oħra (Figura 1). Il-prinċipju ottiku bażiku tiegħu jidher fil-Figura 2. Il-lenti konvessa żgħira fuq ix-xellug fil-figura tirrappreżenta grupp ta 'lentijiet b'tul fokali qasir, imsejħa lenti oġġettiva. Il-lenti konvessa kbira fuq il-lemin tirrappreżenta grupp ta 'lentijiet b'tul fokali twil, imsejħa l-ocular. L-oġġett li għandu jiġi osservat (AB) jitqiegħed kemmxejn barra mill-punt fokali (f1) tal-lenti oġġettiva. Id-dawl mill-oġġett jifforma immaġini reali mkabbra maqluba (B'A') kemmxejn ġewwa l-fokus tal-ocular (f2) wara li jgħaddi mill-lenti oġġettiva. L-għajnejn tal-osservatur ikomplu jkabbru l-immaġni reali (B'A') f'immaġni virtwali maqluba (B"A") permezz tal-ocular.
L-eyepiece tinsab 'il fuq mill-kanna tal-mikroskopju u ġeneralment tikkonsisti f'żewġ lentijiet konvessi. Minbarra li tespandi aktar l-immaġni reali ffurmata mill-lenti oġġettiva, tillimita wkoll il-kamp viżiv osservat mill-għajnejn. Skont l-ingrandiment, hemm tliet tipi ta 'eyepieces użati b'mod komuni: 5 darbiet, 10 darbiet u 15-il darba.
Il-lenti oġġettiva ġeneralment tinsab taħt il-kanna tal-mikroskopju, qrib l-oġġett li qed jiġi osservat. Tikkonsisti minn 8 sa 10 lentijiet. Il-funzjoni tiegħu hija li tkabbar (toħloq immaġni reali mkabbra għall-oġġett), it-tieni hija li tiżgura l-kwalità tal-immaġni, u t-tielet hija li żżid ir-riżoluzzjoni. Lentijiet oġġettivi użati b'mod komuni jistgħu jinqasmu f'ingrandiment baxx (4 ×), ingrandiment medju (10 × jew 20 ×), ingrandiment għoli (40 ×) u lenti oġġettiva ta 'immersjoni taż-żejt (100 ×) skont it-tkabbir. Lentijiet oġġettivi multipli huma mmuntati fuq ir-rota tal-bidla tal-mera, u l-lenti oġġettiva b'multipli differenti jistgħu jintgħażlu billi ddawwar it-turntable kif meħtieġ.
L-ingrandiment tal-mikroskopju huwa l-multiplu tal-ocular immultiplikat bl-objettiv. Pereżempju, jekk l-ocular hija 10 darbiet u l-lenti oġġettiva hija 40 darba, l-ingrandiment huwa 40 × 10 darbiet (ingrandiment 400 darba). Mikroskopju tajjeb jista 'jkabbar 2000 darba u jista' jiddistingwi żewġ punti 1×10-5ċm 'il bogħod minn xulxin.
Meta d-dawl abjad jgħaddi mill-lenti konvessa, id-dawl b'wavelength iqsar (blu-vjola) għandu rifrazzjoni akbar mid-dawl b'tul ta 'mewġ twil (aħmar-oranġjo). Għalhekk, waqt l-immaġini, hemm diversi spettri madwar l-immaġni, u hemm ċirku ta 'dawl blu jew aħmar. Dan id-difett tal-kulur jissejjaħ aberrazzjoni kromatika. Minħabba l-angoli differenti li fihom id-dawl jidħol (u joħroġ) mid-diversi partijiet tal-wiċċ tal-lenti, id-dawl li jgħaddi mill-periferija tal-lenti jiġi rifrattjat f'angolu akbar mid-dawl li jgħaddi miċ-ċentru tal-lenti. Għalhekk, immaġini mċajpra u mgħawġa jidhru madwar iċ-ċirkonferenza tal-immaġni waqt l-immaġini. Dan id-difett tal-kurvatura tal-wiċċ tal-immaġini jissejjaħ aberrazzjoni sferika. Serje ta 'gruppi ta' lenti konvessi u konkavi b'forom, strutturi u distanzi differenti jikkooperaw ma 'xulxin biex jikkoreġu l-aberrazzjoni kromatika u l-aberrazzjoni sferika sa l-akbar limitu, u jiffurmaw immaġni qawwija, ċara u preċiża. Dan huwa għaliex l-ocular jew il-lenti oġġettiva hija magħmula minn sett ta 'lentijiet rispettivament. Lentijiet bħal dawn jissejħu akromati tal-pjan.
Meta d-dawl jiġi pproġettat minn mezz wieħed (bħal arja) għal mezz ieħor aktar dens (bħal ħġieġ), se jitgħawweġ għal-"linja normali" (linja perpendikolari għall-interface tal-medju), bħall-linja BOA fil-Figura 3. Meta d-dawl jidħol minn mezz dens (ħġieġ) f'mezz mhux dens (arja), se jiddevja mil-"linja normali", bħall-linja AOB (Figura 3a). Meta d-dawl jgħaddi mill-ħġieġ tal-kondensatur (indiċi refrattiv 1.51) u jidħol fl-arja, se jiddevja wkoll u jirrifratta 'l barra, għalhekk l-ammont ta' dawl li jidħol fil-lenti oġġettiva jitnaqqas ħafna, u r-riżoluzzjoni tal-immaġni titnaqqas ukoll. Meta tuża lenti oġġettiva 100x, jekk iż-żejt ikun mimli bejn il-lenti oġġettiva u l-ħġieġa li tkopri (l-indiċi refrattiv huwa wkoll 1.51) biex tiżola l-arja, id-dawl jista 'jidħol fil-lenti oġġettiva kważi mingħajr rifrazzjoni, li żżid il-luminożità u r-riżoluzzjoni ta' l-immaġni. Tali għanijiet jissejħu objettivi ta' immersjoni taż-żejt (Figura 3b).
Il-kondensatur jinsab taħt l-istadju tal-mikroskopju, li jista 'jikkonverġi d-dawl mis-sors tad-dawl, jikkonċentra d-dawl fuq il-kampjun, u jagħmel il-kampjun irradjat b'mod uniformi b'intensità moderata tad-dawl. It-tarf t'isfel tal-kondensatur huwa mgħammar b'waqfien tal-apertura (dijaframma) biex jikkontrolla l-ħxuna tar-raġġ.
Is-sors ta 'illuminazzjoni tal-mikroskopju ottiku ordinarju jinsab taħt il-kondensatur, li huwa bozza tad-dawl qawwija speċjali b'illuminazzjoni uniformi, u hija mgħammra b'reżistenza varjabbli biex tbiddel l-intensità tad-dawl.
Peress li d-dawl tas-sors tad-dawl ta 'mikroskopju ottiku ordinarju jittrasmetti mill-qiegħ tal-korp tal-lenti, jgħaddi mill-lenti tal-kondensatur, il-lenti oġġettiva, u jilħaq l-ocular, il-kampjun li għandu jiġi osservat għandu jinqata' fi flieli irqaq bi ħxuna ta 'madwar 6 μm li jistgħu jittrasmettu dawl fir-riċerka medika u bijoloġika. U biex tebgħa biex turi tessuti u ċelloli differenti u strutturi fini oħra. Il-proċess kollu tal-ipproċessar jissejjaħ it-teknika konvenzjonali tal-porzjon tat-tessuti, inkluż l-għażla ta 'materjali tat-tessuti xierqa, it-twaħħil tagħhom b'soluzzjoni ta' formaldehyde (formalin), id-deidratazzjoni bl-alkoħol pass pass, l-inkorporazzjoni fil-paraffin, il-qtugħ tat-tessut fi flieli irqaq b'mikrotomu u l-immuntar tagħhom fuq slides tal-ħġieġ, u mbagħad Wara t-tbajja 'b'żebgħa ematossilina-eosina, is-slajds tat-tessut ġew finalment mmuntati f'kolla tar-reżina ottika. Slajds tat-tessuti ppreparati jistgħu jinħażnu għal żmien twil.
L-ocular u l-lenti oġġettiva tal-mikroskopju huma installati fiż-żewġt itruf tal-kanna tal-lenti, u d-distanza tagħhom hija fissa. Poġġi l-pjastra tat-tessut fuq l-istadju, u dawwar il-kamin ta 'aġġustament oħxon biex tressaq l-istadju qrib il-lenti oġġettiva. Il-porzjon tat-tessut jidħol fil-pjan fokali tal-lenti oġġettiva, u l-immaġni tat-tessut fil-kampjun tista 'tidher fl-ocular. Imbagħad uża l-kamin ta 'aġġustament fin biex tagħmel l-immaġni fl-ocular ċara biex tosserva. Meta tinbidel l-ingrandiment, l-ocular jew lenti oġġettiva għandhom jiġu sostitwiti.
