Għaliex għandi bżonn nuża mikroskopju konfokali?
1. Il-mikroskopju ottiku ġie pperfezzjonat permezz tal-isforzi u t-titjib tal-predeċessuri kbar tagħna. Fil-fatt, il-mikroskopju tas-soltu jista 'jagħtina immaġini mikroskopiċi sbieħ faċilment u malajr. Madankollu, l-avveniment li irrevoluzzjona d-dinja ta 'mikroskopji kważi perfetti kien l-invenzjoni tal- "mikroskopju konfokali tal-iskannjar tal-laser". Dan it-tip ġdid ta 'mikroskopju huwa kkaratterizzat minn sistema ottika li tiġbed l-informazzjoni tal-immaġni biss mill-wiċċ li fuqu hija kkonċentrata l-fokus, u billi tbiddel il-fokus waqt li tirkupra l-informazzjoni akkwistata fil-memorja tal-immaġni, huwa possibbli li tinkiseb immaġini li jaqtgħu b' informazzjoni 3-dimensjonali sħiħa. B'dan il-mod, huwa possibbli li tinkiseb faċilment informazzjoni dwar il-forma tal-wiċċ li ma tistax tiġi kkonfermata b'mikroskopju konvenzjonali. Barra minn hekk, filwaqt li "iż-żieda tar-riżoluzzjoni" u "l-approfondiment fil-fond tal-fokus" huma kundizzjonijiet konfliġġenti għal mikroskopji ottiċi konvenzjonali, speċjalment f'ingrandiment għoli, din il-problema tissolva b'mikroskopji konfokali.
2. Vantaġġi tas-Sistema Ottika Confocal
Dijagramma skematika tal-mikroskopju konfokali tal-lejżer
Is-sistema ottika konfokali hija illuminazzjoni tal-punt tal-kampjun, filwaqt li d-dawl rifless jiġi wkoll riċevut bl-użu ta 'riċettur tal-punt. Meta l-kampjun jitqiegħed fil-punt fokali, kważi d-dawl rifless kollu jilħaq il-fotoreċettur, u meta l-kampjun ikun barra mill-fokus, id-dawl rifless ma jistax jilħaq il-fotoreċettur. Fi kliem ieħor, f'sistema ottika konfokali, tinħareġ biss l-immaġni li tikkoinċidi mal-punt fokali, u spots u dawl imxerred inutli huma mblukkati.
3. Għaliex tuża laser?
F'sistema ottika konfokali, il-kampjun jiġi mdawwal f'punt u d-dawl rifless jiġi riċevut minn sensor tal-punt. Għalhekk, sors ta 'dawl punt huwa meħtieġ. Lejżers huma ħafna sors ta 'dawl punt. F'ħafna każijiet, is-sors tad-dawl għall-mikroskopji konfokali huwa sors tad-dawl tal-lejżer. Barra minn hekk, il-monokromatiċità, id-direzzjonalità u l-għamla tar-raġġ eċċellenti tal-lejżers huma raġunijiet importanti għall-adozzjoni mifruxa tagħhom.
4. Osservazzjoni f'ħin reali bbażata fuq skanjar b'veloċità għolja hija possibbli.
Għall-iskannjar bil-lejżer, unità ta 'deflessjoni ottika akustika (Acoustic Optical Deflector, AO prime) tintuża fid-direzzjoni orizzontali, u mera tal-iskannjar tar-raġġ ikkontrollat servo-elettroniku (Servo Galvano-mera) tintuża fid-direzzjoni vertikali. Peress li m'hemm l-ebda vibrazzjoni mekkanika fid-Deflector AO, skanjar b'veloċità għolja huwa possibbli, u osservazzjoni f'ħin reali fuq l-iskrin tal-monitor hija possibbli. Il-veloċità għolja ta 'din il-kamera hija oġġett importanti ħafna li taffettwa direttament il-veloċità tal-fokus u l-irkupru tal-pożizzjoni.
5. Relazzjoni bejn il-Pożizzjoni tal-Focus u l-Luminożità
F'sistema ottika confocal, il-kampjun jitqiegħed b'mod korrett fil-pożizzjoni fokali meta l-luminożità hija zui big, quddiem u warajha, il-luminożità tagħha titnaqqas b'mod qawwi (Figura 4 linja solida). Din is-selettività sensittiva tal-pjan fokali hija l-prinċipju wara l-orjentazzjoni tal-għoli tal-mikroskopju konfokali u l-fond tal-espansjoni tal-fokus. B'kuntrast, il-mikroskopji ottiċi tas-soltu ma juru l-ebda bidla sinifikanti fil-luminożità qabel u wara l-pożizzjoni fokali (linja bit-tikek fil-Fig. 4).
6. Kuntrast Għoli, Riżoluzzjoni Għolja
F'mikroskopju ottiku konvenzjonali, id-dawl rifless mill-porzjon barra mill-fokus tal-mikroskopju jinterferixxi ma 'u jikkoinċidi mal-porzjon tal-immaġini fokali tal-mikroskopju, li jirriżulta fi tnaqqis fil-kuntrast tal-immaġni. B'kuntrast, f'sistema ottika konfokali, dawl imxerred barra l-punt fokali u ġewwa l-lenti oġġettiva jitneħħa kważi kompletament, li jirriżulta f'immaġini b'kuntrast għoli ħafna. Barra minn hekk, is-saħħa tar-riżoluzzjoni tal-mikroskopju titjieb minħabba li d-dawl jgħaddi mill-lenti oġġettiva darbtejn, u jsaħħaħ l-immaġni tal-punt.
7. Funzjoni ta 'lokalizzazzjoni ottika
Fis-sistema ottika konfokali, id-dawl rifless huwa protett mill-mikro-apertura fil-punt għajr il-punt fokali. Bħala riżultat, meta tosserva kampjun tridimensjonali, l-immaġni hija ffurmata bħallikieku l-kampjun kien ġie mqatta' bil-punt fokali (Fig. 5). Dan l-effett jissejjaħ lokalizzazzjoni ottika u hija waħda mill-karatteristiċi tas-sistemi ottiċi konfokali.
