X'inhi d-differenza bejn il-fluworexxenza u l-mikroskopija konfokali tal-lejżer?
mikroskopju fluworexxenti
1. Il-mikroskopju tal-fluworexxenza huwa mezz li juża dawl ultravjola bħala sors tad-dawl biex idawwal l-oġġett li qed jiġi ttestjat, u jġiegħlu joħroġ fluworexxenza, u mbagħad josserva l-għamla u l-pożizzjoni tal-oġġett taħt il-mikroskopju. Il-mikroskopija tal-fluworexxenza tintuża biex tistudja l-assorbiment, it-trasport, id-distribuzzjoni u l-lokalizzazzjoni ta 'sustanzi fi ħdan iċ-ċelloli. Xi sustanzi fiċ-ċelloli, bħall-klorofilla, jistgħu jarmu fluworexxenza wara li jkunu esposti għar-radjazzjoni ultravjola; Xi sustanzi nfushom jistgħu ma jarmux fluworexxenza, iżda jekk imtebba 'b'żebgħat fluworexxenti jew antikorpi fluworexxenti, jistgħu wkoll jarmu fluworexxenza taħt radjazzjoni ultravjola. Il-mikroskopija tal-fluworexxenza hija waħda mill-għodod għar-riċerka kwalitattiva u kwantitattiva dwar dawn is-sustanzi.
2. Prinċipju tal-mikroskopju fluworexxenti:
(A) Sors tad-dawl: Is-sors tad-dawl jarmi dawl ta 'wavelengths varji (minn ultravjola għal infra-aħmar).
(B) Sors tad-dawl tal-filtru tal-eċċitazzjoni: Dawl li jittrasmetti ta 'wavelength speċifiku li jista' jipproduċi fluworexxenza fil-kampjun, filwaqt li jimblokka dawl li huwa inutli għall-fluworexxenza tal-eċċitazzjoni.
(C) Kampjuni fluworexxenti: ġeneralment imtebba 'b'pigmenti fluworexxenti.
(D) Filtru li jimblokka: jittrasmetti b'mod selettiv il-fluworexxenza billi jimblokka d-dawl ta 'eċitazzjoni li ma ġiex assorbit mill-kampjun, u xi wavelengths huma wkoll trasmessi b'mod selettiv fil-fluworexxenza. Mikroskopju li juża dawl ultravjola bħala sors tad-dawl biex jarmi fluworexxenza mill-oġġett irradjat. Il-mikroskopju elettroniku ġie mmuntat għall-ewwel darba minn Knorr u Harroska f'Berlin, il-Ġermanja fl-1931. Dan it-tip ta 'mikroskopju juża raġġ ta' elettroni b'veloċità għolja minflok raġġ ta 'dawl. Minħabba l-wavelength ħafna iqsar tal-fluss tal-elettroni meta mqabbel mal-mewġ tad-dawl, l-ingrandiment tal-mikroskopju elettroniku jista 'jilħaq 800000 darba, b'limitu minimu ta' riżoluzzjoni ta '0.2 nanometri. Il-mikroskopju elettroniku tal-iskannjar, li beda jintuża fl-1963, jippermetti lin-nies jaraw l-istrutturi ċkejkna fuq il-wiċċ tal-oġġetti.
3. Skop ta 'applikazzjoni: Użat biex tkabbar immaġini ta' oġġetti żgħar. Ġeneralment użat għall-osservazzjoni tal-bijoloġija, mediċina, partiċelli mikroskopiċi, eċċ.
mikroskopju konfokali
1. Mikroskopju konfokali jżid lenti semi-riflettiva mal-mogħdija tad-dawl rifless, li tgħawweġ id-dawl rifless li diġà għadda mill-lenti f'direzzjonijiet oħra. Hemm baffle bi pinhole fil-punt fokali tiegħu, u t-toqba żgħira tinsab fil-punt fokali. Wara l-baffle hemm tubu fotomultiplikatur. Jista 'jiġi immaġinat li d-dawl rifless qabel u wara l-punt fokali tad-dawl ta' sejbien ma jistax jiġi ffukat fuq it-toqba żgħira permezz ta 'din is-sistema konfokali u se jkun imblukkat mill-baffle. Allura l-fotometru jkejjel l-intensità tad-dawl rifless fil-punt fokali.
2. Prinċipju: Mikroskopji ottiċi tradizzjonali jużaw sorsi tad-dawl tal-kamp, u l-immaġni ta 'kull punt fuq il-kampjun tkun affettwata minn diffrazzjoni jew dawl imxerred minn punti ġirien; Mikroskopju konfokali tal-iskannjar bil-lejżer juża raġġ tal-lejżer biex jifforma sors ta 'dawl punt permezz ta' pinhole illuminat biex jiskennja kull punt fil-pjan fokali tal-kampjun. Il-punt illuminat fuq il-kampjun huwa immaġni fil-pinhole ta 'skoperta, u jiġi riċevut punt b'punt jew linja minn tubu fotomultiplikatur (PMT) jew apparat ta' akkoppjar termoelettriku (cCCD) wara l-pinhole ta 'skoperta, malajr jiffurmaw immaġni fluworexxenti fuq il-monitor tal-kompjuter iskrin. Il-pinhole ta 'l-illuminazzjoni u l-pinhole ta' skoperta huma konjugati relattivi għall-pjan fokali tal-lenti oġġettiva. Il-punti fuq il-pjan fokali huma simultanjament iffukati fuq il-pinhole ta 'l-illuminazzjoni u l-pinhole ta' l-emissjoni, u l-punti barra l-pjan fokali mhux se jiġu immaġni fil-pinhole ta 'skoperta. Dan jirriżulta f'immaġni konfokali li tirrappreżenta s-sezzjoni trasversali ottika tal-kampjun, u tegħleb l-iżvantaġġ ta 'immaġini mċajpra fil-mikroskopija konvenzjonali.
3. Oqsma ta 'applikazzjoni: li jinvolvu mediċina, riċerka fuq annimali u pjanti, bijokimika, batterjoloġija, bijoloġija taċ-ċelluli, tessut u embrijun, xjenza tal-ikel, ġenetika, farmakoloġija, fiżjoloġija, ottika, patoloġija, botanika, newroxjenza, bijoloġija tal-baħar, xjenza tal-materjali, xjenza elettronika, mekkanika, ġeoloġija tal-petroleum, u mineraloġija.
