X'inhuma l-vantaġġi tal-mikroskopija tal-laser konfokali
Meta mqabbel ma 'mikroskopji tradizzjonali ta' kamp wiesa ', il-mikroskopija konfokali tal-iskannjar bil-lejżer għandha l-karatteristiċi ta' definizzjoni għolja, riżoluzzjoni għolja u sensittività għolja. Huwa użat ħafna fil-qasam tal-bijomediċina u sar għodda importanti tal-immaġini f'dan il-qasam. Għaliex il-confocal jista’ jikseb tant imħabba, u x’vantaġġi għandu? Dan l-artikolu jelenka tliet aspetti biex jiddiskutu l-vantaġġi ta 'confocal.
Iġbor biss is-sinjal fuq il-pjan fokali, u tagħmel l-immaġni ċara minn ċajpir
Allura kif il-mikroskopija konfokali tikseb dan il-vantaġġ? Dan huwa dovut għall-ħardwer konfokali ewlieni—il-pinhole, kif muri fil-Figura 2. Hija toqba żgħira quddiem id-ditekter u mqiegħda fuq il-pjan ottiku konjugat mal-pjan fokali tal-kampjun. Meta d-dawl ta 'eċitazzjoni irradja l-kampjun, kemm il-pjan fokali kif ukoll il-pjan mhux fokali taż-żona tal-kampjun se jkunu eċċitati biex jiġġeneraw sinjali ta' fluworexxenza, aġġusta d-daqs tal-pinhole xieraq (ġeneralment 1 Au), sabiex is-sinjal tal-fluworexxenza fuq il-pjan fokali (linja bit-tikek ħadra) jistgħu jkunu sinjali fluworexxenti (linji dashed ħomor u blu) li jgħaddu mill-pinhole biex jilħqu d-ditekter barra mill-pjan fokali ma jistgħux jilħqu d-ditekter permezz tal-pinhole. Permezz taż-żieda ta 'pinholes tal-ħardwer, il-konfokali jista' jikseb immaġini ċari u ta 'kwalità għolja mingħajr ma jbiddel il-metodu ta' kif isiru mikroskopji fluworexxenti ordinarji.
Minħabba l-eżistenza tal-pinhole, nistgħu nakkwistaw biss is-sinjal fuq il-pjan fokali u niksbu immaġni bidimensjonali b'riżoluzzjoni għolja. Billi taġġusta kontinwament il-pożizzjoni tal-assi Z, jistgħu jinkisbu immaġini bidimensjonali f'pożizzjonijiet differenti tal-assi Z, u tista 'tinkiseb serje ta' immaġini kontinwi ta '"porzjon ottiku". Wara li jinkisbu dawn il-flieli ottiċi, il-modulu 3D mgħammar bis-softwer tal-istrument jista 'jintuża biex jibni mill-ġdid l-immaġni 3D biex tinbena immaġni 3D ċara. Din il-kollezzjoni mhux distruttiva u kontinwa ta 'immaġini slice ottiċi tirrealizza l-funzjoni ta' "ċellula CT".
L-eżattezza tar-riżultati tal-kololizzazzjoni hija relatata mill-qrib mar-riżoluzzjoni tal-immaġni, għalhekk għandna bżonn nagħżlu metodu ta 'immaġini ta' riżoluzzjoni ogħla meta nwettqu esperimenti ta 'kololizzazzjoni. Meta mqabbel ma 'mikroskopji tradizzjonali, il-mikroskopija konfokali saret għodda qawwija għar-riċerka tal-kololizzazzjoni minħabba l-vantaġġi ta' riżoluzzjoni għolja tagħha.
Minħabba l-eżistenza tal-limitu tad-diffrazzjoni, ir-riżoluzzjoni ottika konfokali konvenzjonali hija ta 'madwar 200nm. Meta għandna bżonn nosservaw strutturi akbar minn 200nm, confocal jista 'jiddetermina b'mod preċiż il-grad ta' colocalization. Jekk tkun meħtieġa analiżi tal-kolokazzjoni, jista 'jintgħażel il-modulu tal-analiżi tal-kololizzazzjoni mgħammar fis-softwer confocal.
