Bosta mikroskopji ottiċi speċjali u d-differenzi tagħhom
1 mikroskopju kamp skur
Il-mikroskopju tal-kamp skur m'għandux il-funzjoni li josserva l-istruttura fina ġewwa l-oġġett, iżda jista 'jiddistingwi l-eżistenza u l-moviment ta' partiċelli 'l fuq minn 0.004 μm. Għalhekk, ħafna drabi jintuża biex josserva l-istruttura taċ-ċelloli ħajjin u l-moviment tal-partiċelli intraċellulari.
Il-prinċipju bażiku tal-mikroskopija tal-kamp skur huwa l-effett Tyndall. Meta raġġ ta 'dawl jgħaddi minn kamra mudlama, "mogħdija" ta' trab qawwi fl-arja tista 'tiġi osservata minn direzzjoni perpendikolari għad-dawl inċidentali. Dan il-fenomenu huwa l-effett Tyndall.
Wara li l-mikroskopju tal-kamp skur jiġi sostitwit b'kondensatur tal-kamp skur fuq mikroskopju ottiku ordinarju, minħabba l-okklużjoni tal-istruttura parabolika interna tal-kondensatur, id-dawl irradjat fuq il-wiċċ tal-oġġett li jrid jiġi spezzjonat ma jistax jidħol direttament fil-lenti oġġettiva u eyepiece, u d-dawl imxerred biss jista 'jgħaddi minnu, għalhekk il-kamp viżiv huwa skur.
L-użu bażiku tal-mikroskopija darkfield huwa kif ġej:
1. Installa kondensatur ta 'kamp skur (jew uża karta sewda ħoxna biex tagħmel tarka ħafifa u poġġiha taħt il-kondensatur ta' mikroskopju ordinarju biex tikseb effetti ta 'kamp skur).
2. Agħżel sors ta 'dawl qawwi, ġeneralment b'dawl tal-mikroskopju biex tevita li d-dawl dirett jidħol fil-lenti oġġettiva.
3. Żid qatra ta 'żejt taċ-ċedru bejn il-kondensatur u s-slajd tal-ħġieġ biex tevita riflessjoni totali tad-dawl li jdawwal fuq il-kondensatur, li ma tilħaqx l-oġġett li jrid jiġi spezzjonat u illuminazzjoni tal-kamp skur.
4. Wettaq aġġustament taċ-ċentru, jiġifieri, ċċaqlaq il-kondensatur orizzontalment sabiex l-assi ottiku tal-kondensatur u l-assi ottiku tal-mikroskopju jkunu strettament fuq linja dritta. Għolli u baxxi l-kondensatur, allinja l-punt fokali tal-kondensatur (il-quċċata tar-raġġ koniku fil-Figura 1-2) mal-oġġett li jrid jiġi ttestjat.
5. Agħżel il-lenti oġġettiva li tikkorrispondi mal-kondensatur, aġġusta t-tul fokali, u topera skond il-metodu ta 'mikroskopju ordinarju.
Stereomikroskopju
Mikroskopji stereo, magħrufa wkoll bħala mikroskopji solidi jew mirja dissecting, immaġni ta 'immaġni spazjali tridimensjonali wieqfa, u għandhom il-karatteristiċi ta' effett stereoskopiku qawwi, immaġini ċari u wiesgħa, distanza ta 'ħidma twila (ġeneralment 110mm) u wiri ta' ingrandiment kontinwu. Ħafna drabi jintuża fil-bijoloġija għal osservazzjoni f'ħin reali waqt id-dissezzjoni
Is-sors tad-dawl ta 'mikroskopju ottiku ordinarju huwa dawl parallel, għalhekk jifforma immaġni pjan bidimensjonali; filwaqt li mikroskopju stereo jadotta passaġġ ottiku b'kanal doppju, u r-raġġi tax-xellug u tal-lemin fit-tubu binokulari għandhom ċertu angolu ta 'vista (ġeneralment 12o15o), u għalhekk tista' Tiġi ffurmata immaġni stereoskopika fi spazju tridimensjonali.
Mikroskopji stereo huma użati b'mod simili għal mikroskopji tad-dawl ordinarji, iżda huma aktar konvenjenti. Id-differenza ewlenija bejn it-tnejn hija:
1. L-oġġetti ta 'spezzjoni ta' mikroskopji stereo m'għandhomx għalfejn isiru fi slides.
2. L-istadju tal-mikroskopju stereo huwa mwaħħal direttament fuq il-bażi tal-mera, u huwa mgħammar b'pannelli b'żewġ naħat iswed u abjad jew pannelli tal-ħġieġ, u l-operatur jista 'jagħżel skont l-oġġett u r-rekwiżiti tal-ispezzjoni tal-mikroskopju.
3. L-immaġini tal-mikroskopju stereo huwa wieqfa, li huwa konvenjenti għal operazzjonijiet ta 'dissezzjoni.
4. Il-mikroskopju stereo għandu biss lenti oġġettiva waħda, u l-ingrandiment tiegħu jista 'jiġi aġġustat kontinwament billi ddawwar il-kamin ta' aġġustament.
mikroskopju fluworexxenti
Il-mikroskopija tal-fluworexxenza hija għodda ottika għal riċerka kwalitattiva u kwantitattiva dwar l-intensità tal-fluworexxenza emessa minn sustanzi intraċellulari.
Hemm żewġ tipi ta 'sustanzi fluworexxenti fiċ-ċelloli, wieħed jista' jiffluworexxenti direttament wara li jkun irradjat minn raġġi ultravjola, bħal klorofilla, eċċ.; sustanzi oħra m'għandhomx din il-proprjetà, iżda jekk imtebba 'b'żebgħat fluworexxenti speċifiċi jew antikorpi fluworexxenti, jistgħu jiġu fluworexxenti minn raġġi ultravjola. Jista 'wkoll jifworexxenti wara l-irradjazzjoni
Mikroskopju tal-Bioluminixxenza Wieqaf/Mikroskopju tal-Bioluminixxenza Invertita
Il-prinċipju tal-mikroskopju fluworexxenti huwa li tuża sors ta 'dawl punt b'effiċjenza luminuża għolja (bħal fanal tal-merkurju bi pressjoni ultra-għolja) biex temetti dawl ta' ċertu wavelength (bħal dawl ultravjola 3650λ jew dawl vjola-blu 4200λ) permezz tas-sistema tal-filtru bħala dawl ta 'eċitazzjoni biex eċċitati sustanzi fluworexxenti fil-kampjun. Wara li tinħareġ il-fluworexxenza ta 'diversi kuluri, hija ffiltrata mill-filtru li jimblokka (jew li jrażżan) wara l-lenti oġġettiva, u mbagħad osservat permezz tal-ingrandiment tal-ocular.
Il-filtru li jimblokka għandu żewġ funzjonijiet: wieħed huwa li jassorbi u jimblokka d-dawl ta 'eċitazzjoni milli jidħol fl-ocular sabiex ma jiddisturbax il-fluworexxenza u jagħmel ħsara lill-għajnejn; l-ieħor huwa li tagħżel u tħalli fluworexxenza speċifika tgħaddi, li turi kulur fluworexxenti speċifiku.
Il-mikroskopji tal-fluworexxenza jistgħu jinqasmu f'żewġ tipi skont il-prinċipju tal-mogħdija ottika:
1. Trażmissjoni Fluworexxenza Mikroskopija
F'mikroskopji fluworexxenti anzjani, is-sors tad-dawl ta 'eċitazzjoni jgħaddi mill-materjal tal-kampjun permezz ta' kondensatur biex teċita l-fluworexxenza. Il-vantaġġ huwa li l-fluworexxenza hija qawwija b'ingrandiment baxx, iżda l-iżvantaġġ huwa li l-fluworexxenza tonqos biż-żieda ta 'ingrandiment. Għalhekk huwa adattat biss għall-osservazzjoni ta 'materjal kampjun akbar.
2. Mikroskopija epi-fluworexxenti
Id-dawl ta 'eċitazzjoni jaqa' mill-lenti oġġettiva 'l isfel sal-wiċċ tal-kampjun, jiġifieri, l-istess lenti oġġettiva tintuża bħala l-kondensatur tal-illuminazzjoni u l-lenti oġġettiva għall-ġbir tal-fluworexxenza.
Splitter tar-raġġ dichroic (mera dichroic) jeħtieġ li jiġi miżjud fil-mogħdija ottika, li tifforma angolu ta '45o mal-assi ottiku. Id-dawl ta 'eċitazzjoni huwa rifless fil-lenti oġġettiva u miġbur fuq il-kampjun. Id-dawl ta 'eċitazzjoni rifless mill-wiċċ tas-slajds jidħol fil-lenti oġġettiva fl-istess ħin, jirritorna għall-isplitter tar-raġġ b'żewġ kuluri, jifred id-dawl ta' eċċitazzjoni mill-fluworexxenza, u d-dawl ta 'eċċitazzjoni li jifdal jiġi assorbit mill-filtru li jimblokka. Jekk tibdel għal taħlita ta 'filtri ta' eċċitazzjoni differenti/spliters tar-raġġ b'żewġ kuluri/filtri ta 'imblukkar, jistgħu jintlaħqu l-ħtiġijiet ta' prodotti ta 'reazzjoni fluworexxenti differenti.
Il-vantaġġ ta 'dan it-tip ta' mikroskopju fluworexxenti huwa li l-illuminazzjoni tal-kamp viżiv hija uniformi, l-immaġini hija ċara, u iktar ma jkun kbir l-ingrandiment, iktar tkun b'saħħitha l-fluworexxenza.
mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi
Mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi huwa mikroskopju li jista 'jikkonverti d-differenza tal-fażi (jew id-differenza tal-passaġġ ottiku) ġġenerata meta d-dawl jgħaddi minn oġġett f'bidla fl-amplitudni (intensità tad-dawl). Huwa prinċipalment użat biex josserva ċelluli ħajjin, sezzjonijiet tat-tessuti mhux imtebba jew kampjuni mtebbgħin nieqsa minn kuntrast.
L-għajn tal-bniedem tista 'tidentifika biss bidliet fil-wavelength (kulur) u l-amplitudni tad-dawl viżibbli, iżda mhux bidliet fil-fażi. Madankollu, il-biċċa l-kbira tal-kampjuni bijoloġiċi huma trasparenti ħafna, u l-amplitudni tal-mewġ tad-dawl bażikament ma tinbidel wara li tgħaddi, u l-fażi biss tinbidel.
Il-mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi bażikament jibdel id-differenza tal-passaġġ ottiku tad-dawl viżibbli li jgħaddi mill-kampjun f'differenza ta 'amplitudni, u b'hekk itejjeb il-kuntrast bejn diversi strutturi u jagħmel diversi strutturi viżibbli b'mod ċar. Id-dawl jiġi rifratt wara li jgħaddi mill-kampjun, jiddevja mill-mogħdija ottika oriġinali, u jittardja b'1/4λ (tul ta 'mewġ) fl-istess ħin. Jekk tiżdied jew titnaqqas b'1/4λ, id-differenza fil-passaġġ ottiku ssir 1/2λ, u ż-żewġ raġġi jinterferixxu wara l-assi ottiku Issaħħaħ, iżid jew tnaqqas l-amplitudni, ittejjeb il-kuntrast.
Strutturalment, il-mikroskopji tal-kuntrast tal-fażi huma differenti minn mikroskopji ottiċi ordinarji fis-sens li:
1. Id-dijaframma annulari għandha dijaframma b'ftuħ ta 'ċirku, li hija installata bejn is-sors tad-dawl u l-kondensatur. Il-funzjoni hija li d-dawl li jgħaddi mill-kondensatur jifforma kon tad-dawl vojt u jiffoka fuq il-kampjun.
2. Pjanċa tal-fażi Il-mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi jżid pjanċa tal-fażi miksija bil-fluworidu tal-manjeżju ġewwa l-lenti oġġettiva biex tittardja l-fażi ta 'dawl dirett jew dawl diffrattat b'1/4λ. Hemm żewġ reġjuni fuq il-pjanċa tal-fażi, il-parti li minnha jgħaddi d-dawl dirett tissejjaħ "wiċċ konjugat", u l-parti li minnha jgħaddi d-dawl diffrattat tissejjaħ "wiċċ ta 'kumpens". Il-pjanċi tal-fażi huma maqsuma f'żewġ tipi skont l-effetti tax-xogħol tagħhom:
(1) Pjanċa ta 'fażi plus: id-dawl dirett jittardja b'1/4λ, u l-mewġ tad-dawl huma sovraposti wara li ż-żewġ settijiet ta' mewġ tad-dawl jingħaqdu biex iżidu l-amplitudni, u l-istruttura tal-kampjun hija isbaħ mill-medju tal-madwar, li jiffurmaw a kuntrast qawwi (jew kuntrast negattiv).
(2) B flimkien mal-pjanċa tal-fażi: Id-dawl diffrattat jittardja b'1/4λ, u l-mewġ tad-dawl taż-żewġ gruppi ta 'dawl jitnaqqsu wara li l-assi jiġi allinjat, u l-amplitudni ssir iżgħar. L-istruttura tal-kampjun hija aktar skura mill-medju tal-madwar, u tifforma kuntrast skur (jew kuntrast pożittiv). Il-lenti oġġettiva bi pjanċa tal-fażi tissejjaħ lenti tal-objettiv tal-kuntrast tal-fażi, li ħafna drabi hija mmarkata b'"Ph" fuq il-housing tal-lenti oġġettiva.
