Il-vantaġġi u l-iżvantaġġi tal-mikroskopija tal-iskannjar bil-lejżer multifoton
Multi-Photon Laser Scanning Microscopy hija metodu sperimentali bbażat fuq teknoloġija tal-mikroskopija tal-iskannjar bil-lejżer li tipprovdi kapaċitajiet ta 'sezzjoni ottika aktar preċiżi fil-wiri 3D. Il-metodu ta 'eċitazzjoni tal-fluworexxenza multifoton juża wavelengths twal ta' dawl aħmar jew qrib infra-aħmar biex jakkwista stampi fluworexxenti b'riżoluzzjoni għolja ta 'kampjuni b'qtil minimu ta' kampjuni attivi, li jagħmilha adattata għall-immaġini ta 'ċelloli ħajjin, speċjalment tessuti ħajjin ħoxnin bħal flieli tal-moħħ, embrijuni, organi sħaħ u anke organiżmi sħaħ.
Il-vantaġġi huma kif ġej:
1, l-użu ta 'dawl aħmar jew eċċitazzjoni ta' dawl infra-aħmar, it-tifrix tad-dawl huwa żgħir (it-tifrix ta 'partiċelli żgħar u l-wavelength tar-raba' qawwa tal-proporzjon invers).
2, ma teħtieġx pinhole, tista 'tiġbor fotoni aktar imxerrda mill-cross-section ta' l-immaġini.
3, il-pinhole ma jistax jiddistingwi bejn il-fotoni mferrxa emessi mir-reġjun barra mill-fokus jew iż-żona fokali, multi-photon fil-proporzjon tas-sinjal għall-istorbju tal-immaġini fil-fond huwa tajjeb.
4, eċitazzjoni ta 'foton wieħed ta' dawl ultravjola jew viżibbli użat fir-raġġ biex jilħaq il-pjan fokali qabel ma l-kampjun jiġi assorbit u attenwat faċilment, mhux faċli għal eċċitazzjoni profonda.
5, fl-osservazzjoni tal-mikroskopju bijoloġiku, * l-ewwel konsiderazzjoni hija li ma ssirx ħsara lill-istat attiv tal-organiżmu innifsu, li żżomm l-ilma, il-konċentrazzjoni tal-jone, l-ossiġnu u ċ-ċirkolazzjoni tan-nutrijent. F'okkażjonijiet ta 'osservazzjoni ħafifa, kemm l-enerġija termali kif ukoll dik foton trid tibqa' fiċ-ċellula mingħajr ħsara lill-ammont ta 'irradjazzjoni, enerġija ħafifa.
6, mikroskopju multi-foton għandu wkoll ħafna vantaġġi. Bħal riżoluzzjoni tridimensjonali, intrużjoni fil-fond, fl-effiċjenza tat-tifrix, dawl fl-isfond, proporzjon tas-sinjal għall-ħoss, kontroll, eċċ., Hemm mikroskopji tal-laser preċedenti m'għandhomx jew għandhom inkomparabbli lil hinn mill-karatteristiċi.
Il-mikroskopju tal-iskannjar tal-laser konfokali b'ħafna fotoni ġie estiż għal diversi oqsma ta 'riċerka u applikazzjoni. Huwa kapaċi ta 'osservazzjoni tridimensjonali mhux distruttiva ta' kampjuni fl-istat naturali tagħhom, u jista 'jtejjeb ir-riżoluzzjoni u l-proporzjon tas-sinjal għall-ħoss tas-sistema. Bl-użu tal-bidla tal-proprjetajiet tal-materjal wara eċitazzjoni multi-foton, huwa wkoll possibbli li tinkiseb ħażna ta 'dejta ta' għoli tridimensjonali u mikrofabbrikazzjoni tridimensjonali fi kwalunkwe direzzjoni, li għandha valur ta 'applikazzjoni għoli. Jista 'jkun maħsub li bl-iżvilupp ulterjuri ta' makkinarju, materjali, teknoloġija tal-laser u teknoloġiji oħra relatati mal-mikroskopija konfokali multifoton, mikroskopju tal-iskannjar tal-laser confocal multifoton se jkun żvilupp akbar u applikazzjoni usa '.
L-iżvantaġġi huma kif ġej:
1, immaġini ta 'fluworexxenza biss.
2, jekk il-kampjun jinkludi kromofori li jistgħu jassorbu d-dawl ta 'eċitazzjoni, bħal pigmenti, il-kampjun jista' jkun bil-ħsara termikament.
3, ir-riżoluzzjoni hija kemmxejn imnaqqsa, għalkemm tista 'titjieb bl-użu simultanju ta' apertura konfokali, iżda se jkun hemm telf ta 'sinjal.
4. L-ispiża tal-mikroskopija tal-iskannjar multifoton hija għolja minħabba l-limitazzjoni ta 'lejżers ultrafast għaljin.
