Klassi ta 'Immaġini Mikroskopiċi丨Mikroskopju ta' Fluworexxenza ta 'kamp wiesa'
F'applikazzjonijiet ta 'immaġni ta' ċelluli ħajjin, mikroskopija ta 'fluworexxenza ta' kamp wiesa 'tiffaċilita l-osservazzjoni tad-dinamika ta' ċelloli aderenti mkabbra f'kmamar ambjentali speċifiċi mqiegħda fuq l-istadju tal-mikroskopju. Fil-konfigurazzjoni l-aktar bażika tiegħu, mikroskopju standard tal-kultura tat-tessuti maqluba mgħammar b'illuminazzjoni ta 'fluworexxenza EPI huwa akkoppjat ma' sistema ta 'detector ta' firxa ta 'żona (ġeneralment kamera CCD), filtri ta' fluworexxenza xierqa, u sistema ta 'shutter biex tillimita l-espożizzjoni eċċessiva taċ-ċelloli għal dawl ta' eċċitazzjoni ta 'ħsara. . Il-mikroskopija tal-fluworexxenza bażika tiddependi fuq filtri ta 'interferenza mqabbla bir-reqqa biex tagħżel bandwidths speċifiċi għall-illuminazzjoni u l-iskoperta tad-dawl emess. Is-sorsi tad-dawl jinkludu lampi tal-ark tal-merkurju, tal-kseno u tal-alid tal-metall, sistemi tal-lejżer li jespandu r-raġġ, u dajowds li jarmu d-dawl (LEDs), li kollha jeħtieġu speċifikazzjonijiet differenti tal-filtri. Fluworofori sintetiċi użati fil-mikroskopija fluworexxenti għandhom spettri ta 'emissjoni li jkopru r-reġjuni qrib ultravjola, viżibbli u qrib infra-aħmar. L-użu ta 'proteini fluworexxenti kodifikati ġenetikament espandiet ħafna l-kapaċitajiet tal-mikroskopija tal-fluworexxenza fl-immaġini ta' ċelluli ħajjin, li ppermettiet lir-riċerkaturi jimmiraw b'mod preċiż reġjuni subċellulari ta 'interess.
Nuohai LS 18, tip ġdid ta 'mikroskopju ta' illuminazzjoni ta 'folja ħafifa żviluppat b'mod indipendenti minn Nuohai, huwa ddisinjat apposta għal immaġni 3D b'riżoluzzjoni għolja ta' kampjuni ta 'tessuti kbar trasparenti, u huwa ddedikat biex jesplora diversi tessuti intatti bħall-moħħ, il-milsa, il-musrana ż-żgħira. , kliewi, pulmun, qalb, u tumur. Struttura preċiża 3D tal-organi.
Fil-fluworexxenza ta 'kamp wiesa', l-emissjoni b'apertura sħiħa miġbura mill-objettiv tal-mikroskopju timmassimizza s-sinjal irreġistrat filwaqt li timminimizza l-ħin ta 'espożizzjoni meħtieġ. Għalhekk, il-kampjuni jistgħu jiġu stampati b'perjodi ta 'dawl qosra ħafna. L-iżvantaġġ ewlieni tal-immaġini widefield huwa li l-fluworexxenza minn reġjuni 'l bogħod mill-pjan fokali, kif ukoll is-sinjal fl-isfond, hija dawl mhux mixtieq li ħafna drabi joskura l-karatteristiċi ta' interess. Għalhekk, l-immaġini widefield tagħti l-aħjar riżultati meta l-karatteristiċi ta 'interess huma kbar (bħal organelli) jew punteġġjati ħafna fin-natura. Varjetà wiesgħa ta 'kampjuni ta' ċelluli ħajjin, inklużi ċelloli aderenti, batterji, ħmira, u sezzjonijiet ta 'tessut irqaq ħafna, huma kandidati ideali għal immaġini ta' fluworexxenza widefield, madankollu, tessuti eħxen (aktar minn 5 mikroni) jintużaw l-aħjar b'immaġini ta 'metodu aktar avvanzat.
Għalkemm kien hemm ħafna avvanzi fl-immaġini fluworexxenti b'żebgħat fluworexxenti sintetiċi, tikek quantum, u proteini fluworexxenti, f'xi każijiet huwa utli li tgħaqqad il-fluworexxenza ma 'modalitajiet oħra ta' immaġini. Bħala eżempju, DIC jista 'jintuża flimkien ma' fluworexxenza ta 'kamp wiesa' biex jimmonitorja l-vijabbiltà taċ-ċelluli u l-morfoloġija ġenerali filwaqt li jiġu studjati fenomeni ta 'interess għal miri speċifiċi ttikkettjati. L-akkwist ta 'DIC u fluworexxenza f'immaġni waħda normalment mhuwiex prattiku, iżda f'mikroskopju kkonfigurat sew iż-żewġ tekniki jistgħu jintużaw b'mod sekwenzjali. Għalhekk, wara l-immaġini fil-modalità epifluworexxenza, immaġini DIC jistgħu jiġu akkwistati minn kampjuni ttikkettjati fluworexxenti bl-użu ta 'dawl trażmess. Iż-żewġ immaġini jistgħu jingħaqdu matul l-analiżi ta 'wara. L-akkwist simultanju ta 'DIC u immaġini ta' fluworexxenza huwa possibbli f'konfigurazzjonijiet avvanzati ta 'mikroskopju ta' kamp wiesa 'bl-użu ta' illuminazzjoni separata spettralment (bħal viżibbli u infrared qrib) u adapters tal-kamera b'kamera doppja jew b'vista maqsuma. Fil-biċċa l-kbira tal-mikroskopji konfokali tal-iskannjar bil-lejżer, l-immaġini jistgħu jiġu akkwistati kemm fil-modi ta 'fluworexxenza kif ukoll f'DIC simultanjament, u jeliminaw il-ħtieġa għall-ipproċessar ta' wara l-akkwist. Il-kuntrast tal-fażi u l-kuntrast tal-modulazzjoni Hoffman jistgħu jintużaw ukoll flimkien ma 'mikroskopija ta' fluworexxenza ta 'kamp wiesa'. Madankollu, f'dawn it-tekniki, il-lenti oġġettiva hija speċjali, kemm jekk hija ċirku tal-fażi jew pjanċa ta 'modulazzjoni Hoffman, se tikkawża telf ta' intensità ta 'emissjoni ta' 5-15 fil-mija.
Link tal-artiklu: Netwerk ta' Tagħmir tal-Istrument https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-1123.html
