Fluworexxenza bi prezz baxx u disinn ta 'mikroskopju ta' kamp qawwi
F'din il-gwida, ser nirrevedi l-prinċipji bażiċi tal-mikroskopija fluworexxenti u kif nibni tliet mikroskopji fluworexxenti differenti bi prezz baxx. Dawn is-sistemi tipikament jiswew eluf ta 'dollari, iżda sforzi riċenti għamluhom aktar faċli biex jinkisbu. Id-disinn li qed nintroduċi hawn juża smartphones, dSLR, u mikroskopji USB. Dawn id-disinji kollha jistgħu jintużaw ukoll bħala mikroskopji open field.
Pass 1: Ħarsa ġenerali tal-mikroskopija tal-fluworexxenza
Biex tifhem il-kunċetti bażiċi tal-mikroskopija fluworexxenti, immaġina l-foresti densi, siġar, annimali, arbuxelli, u foresti oħra li jgħixu fil-foresta bil-lejl. Jekk shine flashlight fil-foresta, se tara dawn l-istrutturi kollha u huwa diffiċli li timmaġina annimali jew pjanti speċifiċi. Jekk wieħed jassumi li inti interessat biss li tara arbuxelli tal-blueberry fil-foresta. Biex tikseb dan, għandek bżonn tħarreġ fireflies biex ikunu attirati biss minn arbuxxelli blueberry, sabiex meta tħares lejn il-foresta, arbuxxelli blueberry biss jixegħlu. Tista 'tgħid li mmarkajt l-arbuxxelli tal-blueberry bil-fireflies, sabiex tkun tista' tara l-istrutturi tal-blueberry fil-foresta.
F'din l-analoġija, il-foresta tirrappreżenta l-kampjun kollu, l-arbuxxell tal-blueberry jirrappreżenta l-istruttura li trid tara (bħal ċelloli speċifiċi jew organelli subċellulari), u l-fireflies huma komposti fluworexxenti. Is-sitwazzjoni tal-isparar ta 'flashlight waħdu mingħajr fireflies hija simili għal mikroskopju kamp qawwi.
Il-pass li jmiss huwa li tifhem il-funzjonijiet bażiċi tal-komposti fluworexxenti (magħrufa wkoll bħala fluworofori). Raggruppamenti fluworexxenti huma fil-fatt oġġetti żgħar (nanoscale) iddisinjati biex jgħaqqdu strutturi speċifiċi fil-kampjun. Huma jassorbu dawl ta 'firxa dejqa ta' wavelengths u jerġgħu jarmu dawl ta 'wavelength ieħor. Pereżempju, grupp fluworexxenti jista' jassorbi dawl blu (jiġifieri l-grupp fluworexxenti huwa eċitat bid-dawl blu) u mbagħad jerġa' joħroġ dawl aħdar. Normalment, dan huwa miġbur fil-qosor permezz ta 'eċċitazzjoni u spettri ta' emissjoni (kif muri fil-figura ta 'hawn fuq). Dawn it-tabelli juru l-wavelengths tad-dawl assorbit mill-fluworophore u l-wavelengths tad-dawl emess mill-fluworophore.
Id-disinn tal-mikroskopju huwa simili ħafna għal dak ta 'mikroskopju regolari ta' kamp miftuħ, b'żewġ differenzi ewlenin. L-ewwelnett, id-dawl li jdawwal il-kampjun għandu jkun fil-wavelength tal-grupp fluworexxenti eċċitati (għall-eżempju ta 'hawn fuq, id-dawl huwa blu). It-tieni nett, il-mikroskopju jeħtieġ biss li jiġbor id-dawl emess (dawl aħdar) filwaqt li jimblokka d-dawl blu. Dan għaliex id-dawl blu jinsab kullimkien, iżda d-dawl aħdar ġej biss minn strutturi speċifiċi fil-kampjun. Biex jimblokka d-dawl blu, il-mikroskopji ġeneralment ikollhom xi ħaġa li tissejjaħ filtru ta 'passa twila li tippermetti li d-dawl aħdar jgħaddi mingħajr dawl blu. Kull filtru pass twil għandu wavelength ta 'qtugħ. Jekk il-wavelength tad-dawl huwa akbar mill-wavelength ta 'qtugħ, jista' jgħaddi minn filtru. Għalhekk, l-isem huwa "Long Distance Pass". Wavelengths iqsar huma mblukkati.
Pass 2: Immudellar ta 'mikroskopju bl-użu ta' ottika ottika
Dan huwa pass addizzjonali fit-tfassil tal-prinċipju bażiku ta 'mikroskopju. M'hemmx bżonn li tinbena mikroskopju fluworexxenti, għalhekk jekk ma tridx tidħol fl-ottika, tista 'taqbeżha.
Kemm mikroskopji kamp qawwi kif ukoll fluworexxenti jistgħu jiġu mmudellati bl-użu ta 'apparat ottiku tar-raġġi. Il-premessa bażika tal-ottika tar-raġġi hija li l-imġieba tad-dawl hija simili għal dik tad-dawl li jippropaga 'l bogħod minn sors tad-dawl. Meta tħares madwar il-kamra, tara d-dawl tax-xemx barra mit-tieqa jew id-dawl miġjub mill-bozza tad-dawl. Imbagħad id-dawl jiġi assorbit jew rifless minn oġġetti fil-kamra. Xi dawl rifless se jagħmilha tiffaċċja għajnejn tiegħek. Jekk oġġett ikun illuminat, tista 'timmaġina kull punt fuq l-oġġett li jarmi d-dawl fid-direzzjonijiet kollha (kif muri fl-immaġni ta' hawn fuq). Il-lenti, bħall-lenti fl-għajnejn tagħna, tiffoka d-dawl sa punt sabiex inkunu nistgħu naraw l-oġġett. Mingħajr lenti, id-dawl ikompli jinfirex 'il barra u ma jifformax immaġni.
