Laser Scanning Multiphoton Microscopy Vantaġġi Mtejba
Il-mikroskopju multifoton tal-iskannjar bil-lejżer huwa titjib sinifikanti tal-mikroskopija ottika, prinċipalment manifestat fil-kapaċità li tosserva strutturi fil-fond ta 'ċelloli ħajjin, ċelloli fissi, u tessuti, u tikseb strutturi ċari u li jaqtgħu b'ħafna saffi Z-plane, jiġifieri flieli ottiċi, li jistgħu jintużaw biex jinbnew strutturi solidi tridimensjonali ta' kampjuni. Mikroskopju konfokali juża sors tad-dawl tal-lejżer, li huwa estiż biex jimla l-pjan fokali kollu tal-lenti oġġettiva, u mbagħad ikkonverġi f'punti żgħar ħafna fuq il-pjan fokali tal-kampjun permezz tas-sistema tal-lenti tal-lenti oġġettiva. Skont l-apertura numerika tal-lenti oġġettiva, id-dijametru tal-punt ta 'illuminazzjoni qawwi huwa madwar 0.25-0.8 μ m, u l-fond huwa madwar 0.{{7} }.5 μ m. Id-daqs tal-punt konfokali huwa determinat mid-disinn tal-mikroskopju, il-wavelength tal-lejżer, il-karatteristiċi oġġettivi, is-settings tal-istat tal-unità tal-iskannjar, u l-proprjetajiet tal-kampjun. Il-firxa ta 'illuminazzjoni u l-fond ta' mikroskopju tal-kamp huma kbar, filwaqt li l-illuminazzjoni ta 'mikroskopju konfokali hija ffokata fuq punt fokali fuq il-pjan fokali. Il-vantaġġ bażiku tal-mikroskopija konfokali huwa li tista 'twettaq sezzjoni ottika fina fuq kampjuni fluworexxenti ħoxnin (sa 50 μ m jew aktar), bi ħxuna ta' bejn wieħed u ieħor 0.5 sa 1.5 μ m. Is-serje ta 'immaġini slice ottiċi tista' tinkiseb billi l-kampjun jitmexxa 'l fuq u 'l isfel bl-użu tal-mutur stepper ta' l-assi Z tal-mikroskopju. Il-ġbir ta 'informazzjoni dwar l-immaġni huwa kkontrollat fi ħdan il-pjan * *, mingħajr interferenza minn sinjali emessi minn pożizzjonijiet oħra fuq il-kampjun. Wara li tneħħi l-influwenza tal-fluworexxenza fl-isfond u żżid il-proporzjon tas-sinjal għall-istorbju, il-kuntrast u r-riżoluzzjoni ta 'immaġini konfokali huma mtejba b'mod sinifikanti meta mqabbla ma' immaġini ta 'fluworexxenza ta' illuminazzjoni tal-kamp tradizzjonali. F'ħafna kampjuni, komponenti strutturali kkomplikati jingħaqdu biex jiffurmaw sistemi kumplessi, iżda ladarba jkunu jistgħu jinġabru biżżejjed sezzjonijiet ottiċi, nistgħu nużaw softwer biex nibnu mill-ġdid fi tliet dimensjonijiet. Dan il-metodu sperimentali intuża ħafna fir-riċerka bijoloġika biex jiċċara r-relazzjonijiet strutturali u funzjonali kumplessi bejn ċelloli jew tessuti.
