Introduzzjoni għall-klassifikazzjoni u l-użu ta 'diversi mikroskopji ottiċi
Hemm ħafna metodi ta 'klassifikazzjoni ta' mikroskopji ottiċi: skond in-numru ta 'eyepieces użati, jista' jinqasam f'mikroskopji binokulari u monokulari; skond jekk l-immaġni għandhiex effett stereo, tista 'tinqasam f'mikroskopji stereo u mikroskopji mhux stereo; skond l-oġġett ta 'osservazzjoni, jista' jinqasam f'mikroskopji bijoloġiċi u mikroskopji tad-deheb. mikroskopju. Mikroskopju tal-fażi, eċċ.; skond il-prinċipju ottiku, jista 'jinqasam f'mikroskopju tad-dawl polarizzat, mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi u mikroskopju ta' interferenza differenzjali, eċċ.; skond it-tip ta 'sors tad-dawl, jista' jinqasam f'dawl ordinarju, fluworexxenza, dawl ultravjola, dawl infra-aħmar u mikroskopju tal-lejżer, eċċ.; skond it-tip ta 'riċevitur, jista' jinqasam f'Viżjoni, mikroskopju diġitali (kamera), eċċ Mikroskopji użati komunement jinkludu mikroskopju stereo binokulari, mikroskopju metallografiku, mikroskopju tad-dawl polarizzat, mikroskopju fluworexxenti, eċċ.
1. Mikroskopju Stereo binokulari
Mikroskopju stereo binokulari, magħruf ukoll bħala "mikroskopju solidu" jew "mera li jiddissezzjona", huwa strument viżwali b'sens stereoskopiku pożittiv. Huwa użat ħafna fil-kirurġija tal-porzjon u l-mikrokirurġija fil-qasam bijomediku; fl-industrija, huwa użat għall-osservazzjoni, assemblaġġ u spezzjoni ta 'partijiet żgħar u ċirkwiti integrati. Għandu l-karatteristiċi li ġejjin:
(1) Bl-użu ta 'passaġġ ottiku b'kanal doppju, ir-raġġi tax-xellug u tal-lemin fit-tubu binokulari mhumiex paralleli, iżda għandhom ċertu angolu - l-angolu tal-vista tal-volum (ġeneralment 12-il grad -15 grad), jiġifieri, il- travi tax-xellug u tal-lemin. Iż-żewġ għajnejn jipprovdu immaġni tridimensjonali. Essenzjalment huma żewġ mikroskopji b'tubu wieħed imqiegħda ħdejn xulxin. L-angolu tal-vista ffurmat mill-assi ottiċi taż-żewġ btieti tal-lenti huwa ekwivalenti għall-angolu tal-vista ffurmat meta persuna tosserva oġġett biż-żewġ għajnejn, u b'hekk tifforma immaġni viżiva tridimensjonali fi spazju tridimensjonali.
(2) L-immaġni hija dritta, faċli biex topera u tissekkja, minħabba li l-priżma taħt l-ocular tagħmel l-immaġni rasu 'l isfel.
(3) Għalkemm l-ingrandiment mhuwiex tajjeb daqs dak ta 'mikroskopju tradizzjonali, għandu distanza twila ta' xogħol.
(4) Il-fond fokali huwa kbir, li huwa konvenjenti għall-osservazzjoni tas-saff kollu tal-oġġett spezzjonat.
(5) Id-dijametru tal-kamp viżiv huwa kbir.
L-istruttura ottika ta 'l-isterjoskopju kurrenti hija: permezz ta' lenti ta 'għan ewlieni ordinarju, iż-żewġ raġġi ta' dawl wara l-immaġini ta 'l-oġġett huma separati minn żewġ settijiet ta' lentijiet oġġettivi intermedji-lentijiet zoom biex jiffurmaw angolu tal-vista ġenerali u mbagħad immaġni permezz tal-oculari rispettivi , billi tinbidel l-intermedjarju Id-distanza bejn il-gruppi tal-mera biex tinkiseb il-bidla tal-ingrandiment tagħha, għalhekk tissejjaħ ukoll "Zoom-stereomicroscope". Skont ir-rekwiżiti tal-applikazzjoni, l-isterjoskopju attwali jista 'jkun mgħammar b'ħafna aċċessorji fakultattivi, bħal fluworexxenza, fotografija, vidjografija, sors ta' dawl kiesaħ, eċċ.
2. Mikroskopju metallografiku
Mikroskopju metallografiku huwa mikroskopju użat apposta biex josserva l-istruttura metallografika ta 'oġġetti opaki bħal metalli u minerali. Dawn l-oġġetti opaki ma jistgħux jiġu osservati b'mikroskopji tad-dawl trażmessi ordinarji, għalhekk id-differenza ewlenija bejn il-metallografija u mikroskopji ordinarji hija li l-ewwel juża dawl rifless, filwaqt li l-aħħar juża dawl trażmess għall-illuminazzjoni. Fil-mikroskopju metallografiku, ir-raġġ ta 'illuminazzjoni joħroġ mid-direzzjoni tal-lenti oġġettiva sal-wiċċ tal-oġġett osservat, rifless mill-wiċċ tal-oġġett, u mbagħad jerġa' lura lejn il-lenti oġġettiva għall-immaġini. Dan il-metodu ta 'illuminazzjoni li jirrifletti huwa wkoll użat ħafna fl-ispezzjoni ta' wejfers tas-silikon b'ċirkwit integrat.
3. Mikroskopju polarizzanti
Mikroskopji polarizzanti huma mikroskopji użati biex jistudjaw l-hekk imsejħa materjali anisotropiċi trasparenti u opaki. Is-sustanzi kollha b'birefringence jistgħu jiġu distinti b'mod ċar taħt mikroskopju polarizzanti. Naturalment, dawn is-sustanzi jistgħu wkoll jiġu osservati bit-tbajja ', iżda xi wħud mhumiex possibbli u mikroskopji polarizzanti għandhom jintużaw.
(1) Karatteristiċi ta 'mikroskopji polarizzanti
Metodu biex id-dawl ordinarju jinbidel f'dawl polarizzat għall-mikroskopija biex jiġi identifikat jekk sustanza hijiex monorefringent (fid-direzzjonijiet kollha) jew birrefringent (anisotropika). Birefringence hija proprjetà fundamentali tal-kristalli. Għalhekk, mikroskopji tad-dawl polarizzat jintużaw ħafna f'minerali, kimika u oqsma oħra, u għandhom ukoll applikazzjonijiet fil-bijoloġija, botanika u oqsma oħra.
(2) Il-prinċipju bażiku tal-mikroskopju tad-dawl polarizzat
Il-prinċipju tal-mikroskopija tad-dawl polarizzat huwa aktar ikkumplikat, għalhekk mhux se nintroduċih wisq hawn. Il-mikroskopju polarizzanti għandu jkollu l-aċċessorji li ġejjin: polarizzatur, analizzatur, kumpensatur jew pjanċa tal-fażi, lenti oġġettiva speċjali mingħajr stress, stadju li jdur.
(3) Metodu tal-mikroskopju polarizzanti
Speċi ta '. Ortoskopju: Magħruf ukoll bħala mikroskopju mingħajr distorsjoni, huwa kkaratterizzat mill-użu ta 'lenti oġġettiva ta' ingrandiment baxx minflok lenti Bertrand biex tistudja s-suġġett. Studju dirett b'dawl polarizzat. Fl-istess ħin, sabiex l-apertura ta 'l-illuminazzjoni tkun iżgħar, il-lenti ta' fuq tal-kondensatur hija mbuttata 'l bogħod minn xulxin. Mikroskopju tal-fażi normali jintuża biex jeżamina l-birefringence ta 'oġġett.
b. Conoscope: Magħruf ukoll bħala mikroskopju ta 'interferenza, jistudja l-mudelli ta' interferenza maħluqa meta jinterferixxi dawl polarizzat. Dan il-metodu jintuża biex josserva l-uniaxiality jew biaxiality ta 'oġġett. F'dan il-metodu, raġġ ta 'dawl polarizzat li jikkonverġi b'mod qawwi jintuża għall-illuminazzjoni.
(4) Rekwiżiti għal mikroskopji polarizzanti
Speċi ta '. Sors tad-dawl: L-aħjar huwa li tuża dawl monokromatiku, minħabba li l-veloċità tad-dawl, l-indiċi ta 'rifrazzjoni u l-fenomeni ta' interferenza jvarjaw skont il-wavelengths. Mikroskopji ġenerali jistgħu jużaw dawl ordinarju.
b. Eyepieces: Eyepieces b'crosshairs.
C. Kondensatur: Sabiex jinkiseb dawl polarizzat parallel, għandu jintuża kondensatur swing out li jista 'jimbotta 'l barra l-lenti ta' fuq.
d. Lenti Bertrand: element awżiljarju fil-mogħdija ottika tal-kondensatur, li hija lenti awżiljarja li tkabbar il-fażi primarja kkawżata mill-oġġett fil-fażi sekondarja. Jiggarantixxi l-osservazzjoni bl-ocular ta 'mudell ta' interferenza planari iffurmat fil-pjan fokali ta 'wara tal-objettiv.
(5) Rekwiżiti għal mikroskopji polarizzanti
Speċi ta '. Iċ-ċentru tal-istadju huwa koassjali mal-assi ottiku.
b. Il-polarizzatur u l-analizzatur għandhom ikunu f'pożizzjonijiet kwadraturi.
C. L-isparar m'għandux ikun irqiq wisq.
4. Mikroskopija tal-Fluworexxenza
Il-mikroskopija ta 'fluworexxenza tuża dawl ta' tul ta 'mewġ qasir biex irradja oġġett imtebba 'fluworexxeina biex teċita u tiġġenera fluworexxenza ta' tul ta 'mewġ twil, u mbagħad tosserva. Il-mikroskopija tal-fluworexxenza tintuża ħafna fil-bijoloġija, il-mediċina u oqsma oħra.
(1) Il-mikroskopji tal-fluworexxenza huma ġeneralment maqsuma f'żewġ tipi: tip ta 'trażmissjoni u tip ta' epi-illuminazzjoni.
Speċi ta '. Tip ta 'trażmissjoni: Id-dawl ta' eċċitazzjoni joħroġ mill-wiċċ tal-qiegħ tal-oġġett spezzjonat, u l-kondensatur huwa kondensatur ta 'kamp skur, sabiex id-dawl ta' eċċitazzjoni ma jidħolx fil-lenti oġġettiva, u l-fluworexxenza tidħol fil-lenti oġġettiva. Huwa qawwi b'ingrandiment baxx u skur b'ingrandiment għoli. L-operazzjonijiet ta 'immersjoni u newtralizzazzjoni taż-żejt huma diffiċli, speċjalment il-firxa ta' illuminazzjoni ta 'ingrandiment baxx hija diffiċli biex tiġi ddeterminata, iżda jistgħu jinkisbu sfondi skuri ħafna. It-tip trasmissiv ma jintużax għal oġġetti ta 'spezzjoni opaki.
It-tip ta' trażmissjoni bħalissa huwa kważi eliminat. Ħafna mikroskopji fluworexxenti ġodda huma epitassjali. Is-sors tad-dawl ġej minn fuq l-oġġett tat-test, u hemm splitter tar-raġġ fil-mogħdija ottika, li hija adattata għal oġġetti tat-test trasparenti u opaki. Peress li l-lenti oġġettiva taġixxi bħala kondensatur, mhux biss huwa faċli li topera, iżda wkoll tista 'tikseb illuminazzjoni uniformi tal-kamp viżiv kollu minn ingrandiment baxx għal ingrandiment għoli.
(2) Prekawzjonijiet għall-mikroskopija tal-fluworexxenza
Speċi ta '. Espożizzjoni fit-tul għad-dawl ta 'eċitazzjoni se tikkawża tħassir u tkessiħ tal-fluworexxenza, għalhekk il-ħin ta' osservazzjoni għandu jitqassar kemm jista 'jkun. .
b. Għall-wiri taż-żejt, uża "żejt mhux fluworexxenti".
C. Il-fluworexxenza hija kważi dejjem dgħajfa u għandha titwettaq f'kamra aktar mudlama.
d. Huwa aħjar li tinstalla stabilizzatur tal-vultaġġ fil-provvista tal-enerġija, inkella l-instabilità tal-vultaġġ mhux biss tnaqqas il-ħajja tal-lampa tal-merkurju, iżda taffettwa wkoll l-effett tal-mikroskopju.
Fil-preżent, ħafna oqsma ta 'riċerka bijoloġika emerġenti huma applikati għal tekniki ta' mikroskopija tal-fluworexxenza, bħall-ibridizzazzjoni tal-ġene in situ (FISH).
5. Mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi
Fl-iżvilupp tal-mikroskopju ottiku, l-invenzjoni b'suċċess tal-mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi hija kisba importanti tat-teknoloġija moderna tal-mikroskopju. Aħna nafu li l-għajn tal-bniedem tista 'tiddistingwi biss il-wavelength (kulur) u l-amplitudni (luminożità) tal-mewġ tad-dawl. Għal kampjuni bijoloġiċi bla kulur u trasparenti, meta d-dawl jgħaddi, il-wavelength u l-amplitudni ma jinbidlux ħafna, għalhekk huwa diffiċli li tosserva l-kampjun f'kamp qawwi. .
Mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi huwa li tuża d-differenza tal-passaġġ ottiku tal-oġġett spezzjonat biex twettaq skoperta mikroskopika, jiġifieri, biex tuża b'mod effettiv il-fenomenu ta 'interferenza tad-dawl biex tibdel id-differenza tal-fażi li ma tistax tiġi distinta mill-għajn tal-bniedem f'differenza ta' amplitudni li tingħaraf, anke jekk ikun bla kulur u trasparenti. Il-materja tista 'wkoll issir viżibbli b'mod ċar. Dan jiffaċilita ħafna l-osservazzjoni taċ-ċelloli ħajjin, għalhekk il-mikroskopija tal-kuntrast tal-fażi tintuża ħafna għal mikroskopji invertiti.
Il-mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi huwa differenti minn brightfield fit-tagħmir u għandu xi rekwiżiti speċjali:
a. Installat taħt il-kondensatur u kkombinat mal-kondensatur - kondensatur tal-kuntrast tal-fażi. Tikkonsisti f'dijaframmi annulari ta 'daqsijiet differenti mmuntati fuq diska, bil-kliem 10X, 20X, 40X, 100X, eċċ fuq barra, li jintużaw flimkien ma' lentijiet oġġettivi b'multipli korrispondenti.
b.Phaseplate: Installat fuq il-pjan fokali ta 'wara tal-lenti oġġettiva, huwa maqsum f'żewġ partijiet, waħda hija l-parti li minnha jgħaddi d-dawl dirett, li huwa ċirku trasluċidu msejjaħ il-pjan konjugat; l-oħra hija l-parti li permezz tagħha d-dawl diffrattat "jikkumpensa". Għanijiet bi pjanċi tal-fażi jissejħu "għanijiet tal-kuntrast tal-fażi", u l-kelma "Ph" ħafna drabi tinkiteb fuq il-kisi.
Il-mikroskopija tal-kuntrast tal-fażi hija metodu ta 'mikroskopija relattivament kumpless. Sabiex jinkiseb effett ta 'osservazzjoni tajjeb, id-debugging tal-mikroskopju huwa importanti ħafna. Barra minn hekk, għandhom jiġu nnutati wkoll l-aspetti li ġejjin:
Speċi ta '. Is-sors tad-dawl għandu jkun qawwi u d-dijaframmi kollha tal-apertura għandhom ikunu miftuħa;
b. Uża filtri tal-kulur biex tagħmel il-mewġ tad-dawl kważi monokromatiku.
6. Mikroskopija tal-kuntrast tal-interferenza differenzjali (DIC tal-kuntrast tal-interferenza tal-kera differenti)
Il-mikroskopija tal-kuntrast tal-interferenza differenzjali dehret fis-sittinijiet. Jista 'mhux biss josserva oġġetti bla kulur u trasparenti, iżda wkoll jippreżenta immaġini sterjoskopiċi qawwija, u għandu xi vantaġġi li l-mikroskopija tal-kuntrast tal-fażi ma tistax tikseb. , l-effett ta 'osservazzjoni huwa aktar realistiku.
(1) Prinċipji
Il-mikroskopija tal-kuntrast tal-interferenza differenzjali tuża priżmi Wollaston speċjali biex tkisser ir-raġġ. Id-direzzjonijiet tal-vibrazzjoni tar-raġġi maqsuma huma perpendikolari għal xulxin u l-intensità hija ugwali. Iż-żewġ punti tar-raġġ li jgħaddu mill-oġġett li jrid jiġi spezzjonat huma qrib ħafna ta 'xulxin, u l-fażijiet huma kemmxejn differenti. Peress li d-distanza ta 'separazzjoni bejn iż-żewġ raġġi ta' dawl hija estremament żgħira, m'hemm l-ebda fenomenu ghosting, li jagħmel l-immaġni tidher tridimensjonali.
(2) Partijiet speċjali meħtieġa għall-mikroskopju tal-kuntrast tal-interferenza differenzjali:
a. Polarizzatur
b. Analizzatur
C. 2 priżmi Wollaston
(3) Prekawzjonijiet fil-mikroskopija ta 'kuntrast ta' interferenza differenzjali
Speċi ta '. Minħabba s-sensittività għolja ta 'interferenza differenzjali, m'għandux ikun hemm ħmieġ u trab fuq il-wiċċ tal-pjanċa.
b. Sustanzi b'birefringence ma jistgħux jiksbu l-effett ta 'mikroskopija ta' kuntrast ta 'interferenza differenzjali.
C. Dixxijiet petri tal-plastik ma jistgħux jintużaw meta tiġi applikata interferenza differenzjali għal mikroskopju maqlub.
7. Mikroskopju maqlub (Invertedmicroscope)
Il-mikroskopju maqlub huwa adattat għall-osservazzjoni mikroskopika tal-kultura tat-tessuti, kultura taċ-ċelluli in vitro, plankton, protezzjoni ambjentali, spezzjoni tal-ikel, eċċ fil-qasam bijomediku.
Minħabba l-limitazzjonijiet tal-karatteristiċi tal-kampjun imsemmija hawn fuq, it-tqegħid tal-oġġett li għandu jiġi spezzjonat f'dixx petri (jew flixkun tal-kultura) jeħtieġ distanza ta 'ħidma twila tal-objettiv tal-mikroskopju maqlub u l-kondensatur, u l-oġġett spezzjonat fid-dixx petri jista' jiġu spezzjonati direttament. Osservazzjoni mikroskopika u riċerka. Għalhekk, il-pożizzjonijiet tal-lenti oġġettiva, il-lenti tal-kondensatur u s-sors tad-dawl huma kollha maqluba, għalhekk tissejjaħ "mikroskopju invertit".
Minħabba l-limitazzjonijiet tad-distanza tax-xogħol, l-għanijiet tal-mikroskopju invertit għandhom ingrandiment massimu ta '60X. Ġeneralment, mikroskopji invertiti għar-riċerka huma mgħammra b'għanijiet ta 'kuntrast ta' fażi 4X, 10X, 20X, u 40X, minħabba li mikroskopji invertiti jintużaw l-aktar għal osservazzjoni in vivo bla kulur u trasparenti. Jekk l-utent għandu bżonnijiet speċjali, aċċessorji oħra jistgħu wkoll jintgħażlu biex tlesti l-osservazzjoni ta 'interferenza differenzjali, fluworexxenza u dawl polarizzat sempliċi.
Mikroskopji invertiti jintużaw ħafna fil-morsa tal-garża, ICSI transġeniċi u oqsma oħra.
8. Mikroskopju Diġitali
Mikroskopju diġitali huwa mikroskopju li juża kamera (jiġifieri, objettiv tal-kamera tat-televiżjoni jew apparat akkoppjat ma 'ċarġ) bħala l-element li jirċievi. Kamera hija installata fuq il-wiċċ tal-immaġni reali tal-mikroskopju biex tissostitwixxi l-għajn tal-bniedem bħala riċevitur. L-apparat optoelettroniku jikkonverti l-immaġni ottika f'immaġni tas-sinjal elettriku, u mbagħad iwettaq skoperta tad-daqs u għadd tal-partiċelli. Dan it-tip ta 'mikroskopju jista' jintuża flimkien ma 'kompjuter biex jiffaċilita l-awtomazzjoni tas-sejbien u l-ipproċessar tal-informazzjoni, u jintuża l-aktar f'okkażjonijiet li jeħtieġu ħafna xogħol ta' sejbien tedious.
2. L-użu ta 'diversi mikroskopji ottiċi
Il-mikroskopija tal-fluworexxenza tuża l-fluworexxenza emessa mill-kampjun biex tosserva l-oġġetti;
Mikroskopji stereo jistgħu jintużaw biex josservaw immaġini tridimensjonali ta 'oġġetti;
Il-mikroskopju tal-projezzjoni jista 'jipproġetta l-immaġni tal-oġġett fuq l-iskrin tal-projezzjoni għal nies multipli biex josservaw fl-istess ħin;
Mikroskopji invertiti għall-kultura taċ-ċelluli, il-kultura tat-tessuti u r-riċerka dwar il-mikrobi;
Il-mikroskopju tal-kuntrast tal-fażi jintuża biex josserva kampjuni bla kulur u trasparenti;
Per eżempju, mikroskopija darkfield hija użata biex josservaw batterji u spirochetes. sportivi.
