Kif Agħżel il-Mikroskopju Fluworexxenti t-Tajjeb
Il-mikroskopju tal-fluworexxenza huwa tagħmir tal-immaġini mikroskopiku standard għal-laboratorji u dipartimenti tal-patoloġija. Juża karatteristiċi ta 'fluworexxenza għall-osservazzjoni u l-immaġini. Huwa użat ħafna fil-bijoloġija taċ-ċelluli, newrobijoloġija, botanika, mikrobijoloġija, patoloġija, ġenetika u oqsma oħra. L-immaġini ta 'fluworexxenza għandha l-vantaġġi ta' sensittività għolja u speċifiċità għolja, u hija adattata ħafna għall-osservazzjoni tad-distribuzzjoni ta 'proteini speċifiċi u organelli fit-tessuti u ċelloli, l-istudju ta' kolokalizazzjoni u interazzjoni, it-traċċar ta 'proċessi dinamiċi tal-ħajja bħal bidliet fil-konċentrazzjoni tal-joni , eċċ.
Għażla ta' Mikroskopju
Mikroskopji fluworexxenti huma prinċipalment maqsuma fi tliet kategoriji: mikroskopji fluworexxenti wieqfa (adattati għat-taqsim), mikroskopji fluworexxenti invertiti (adattati għal ċelloli ħajjin, b'kont meħud tat-taqsim), mikroskopji fluworexxenti sterjoskopiċi (adattati għal kampjuni akbar, bħal pjanti, zebrafish (adulti/ embriju), medaka, organi tal-ġrieden/firien, eċċ.).
Għażla ta 'Fluworexxence Filter Cubes
Minbarra li tikkunsidra l-wavelengths ta 'eċċitazzjoni u emissjoni ta' sondi fluworexxenti, l-għażla ta 'blokki tal-filtri teħtieġ ukoll tikkunsidra jekk hemmx eċċitazzjoni mhux speċifika u cross-color għal kampjuni b'tikketti b'ħafna kuluri. Fl-esperiment, aħna nippruvaw nagħżlu l-wavelength l-eqreb għall-quċċata ta 'l-eċitazzjoni għall-eċitazzjoni, u l-firxa li tirċievi għandha tinkludi l-quċċata ta' l-emissjoni. Pereżempju, il-quċċata ta 'l-eċitazzjoni ta' Alexa Fluor 488 hija 500nm, u filtru ta 'eċitazzjoni 480/40 jista' jintgħażel f'mikroskopju fluworexxenti. Il-kubi tal-filtri tal-fluworexxenza komunement użati fil-mikroskopji tal-fluworexxenza jistgħu jinqasmu f'żewġ tipi: pass fit-tul (LP għal qasir) u pass band (BP għal qasir), li jeħtieġ ukoll li jintgħażlu skont il-ħtiġijiet.
Għażla tas-sors tad-dawl fluworexxenti
Sorsi tad-dawl fluworexxenti li jintużaw b'mod komuni bħalissa jinkludu lampi tal-merkurju, lampi tal-alid tal-metall, u sorsi tad-dawl LED li żviluppaw malajr f'dawn l-aħħar snin. L-ispettru tas-sors tad-dawl fluworexxenti huwa kontinwu u mhux kontinwu, u l-enerġija se tkun differenti f'meded differenti. Minħabba l-medda spettrali relattivament dejqa tagħha, produzzjoni ta 'enerġija aktar stabbli, ħajja twila, sigurtà u protezzjoni ambjentali u ħafna vantaġġi oħra, sors tad-dawl LED gradwalment qed isir is-sors tad-dawl ewlieni tal-mikroskopju fluworexxenti.
mikroskopju konfokali
Fl-osservazzjoni tradizzjonali tal-mikroskopju fluworexxenti, minħabba l-koinċidenza ta 'sustanzi li jimmarkaw fluworexxenti u strutturi awtofluworexxenti, huma kkombinati mill-qrib, filwaqt li l-lenti oġġettiva tal-mikroskopju epi-fluworexxenti tradizzjonali mhux biss tiġbor dawl mill-pjan fokali, iżda wkoll tiġbor dawl imxerred 'il fuq u taħt il- pjan fokali, li jirriżulta f'riżoluzzjoni u kuntrast tal-immaġni mnaqqsa ħafna.
L-immaġni konfokali issolvi din il-problema billi tiskopri biss il-porzjon tad-dawl rifless mill-pjan fokali. Is-sors tad-dawl jgħaddi minn pinhole biex jifforma post tad-dawl żgħir u fin fuq il-pjan fokali. Id-dawl emess mill-pjan fokali jinġabar mill-lenti oġġettiva. Ħafna mill-fluworexxenza emessa mill-punt 'il fuq jew taħt il-pjan fokali tal-lenti oġġettiva ma tistax tikkonverġi għat-toqba żgħira. Il-fluworexxenza li tinsab fil-pjan fokali biss u parti żgħira tal-fluworexxenza off-focus jistgħu jgħaddu mill-pinhole, filwaqt li r-raġġi tad-dawl barra l-pjan fokali jikkonverġu fuq quddiem jew wara tal-pjanċa pinhole u huma mblukkati milli jidħlu fid-ditekter permezz il-pinhole. L-immaġni skoperta hija l-immaġni mill-pjan fokali, għalhekk il-kwalità tal-immaġni finali titjieb ħafna.
Minħabba l-vantaġġi u l-prattikabilità tal-funzjonijiet tal-mikroskopju konfokali tal-iskannjar bil-lejżer, il-mikroskopju konfokali huwa assistent sperimentali indispensabbli fil-qasam tal-bijoloġija taċ-ċelluli ta 'preċiżjoni għolja, botanika u riċerka taċ-ċelluli. Fl-istess ħin, Fiċ-ċentru ta 'riċerka xjentifika futura, se tkun l-għodda ta' riċerka xjentifika l-aktar bażika u ewlenija.
