Prinċipji tal-mikroskopija tal-fluworexxenza u karatteristiċi strutturali
Il-mikroskopija tal-fluworexxenza hija l-użu ta 'effiċjenza għolja ta' luminixxenza tal-punt, permezz tal-filtrazzjoni tas-sistema tal-kulur biex titfa 'ċertu wavelength ta' dawl (bħal ultravjola 3650 fil- jew vjola-blu 4200 fil-) bħala d-dawl ta 'eċitazzjoni, l-eċitazzjoni ta 'materjal fluworexxenti fi ħdan il-kampjun jarmi varjetà ta' kuluri differenti ta 'fluworexxenza, u mbagħad eżaltat permezz tal-objettiv u l-oculari għall-osservazzjoni. B'dan il-mod, fl-isfond ta 'kuntrast qawwi, anki jekk il-fluworexxenza hija dgħajfa ħafna, huwa faċli li tiġi identifikata, sensittività għolja, prinċipalment użata għall-istudju tal-istruttura u l-funzjoni taċ-ċelluli u l-kompożizzjoni kimika. L-istruttura bażika ta 'mikroskopju fluworexxenti hija komposta minn mikroskopju ottiku ordinarju flimkien ma' xi aċċessorji (bħal sors ta 'dawl fluworexxenti, filtri ta' eċċitazzjoni, separatur ta 'raġġ b'kulur doppju u filtri li jimblukkaw, eċċ.). Sors tad-dawl fluworexxenti - fanal tal-merkurju ta 'pressjoni ultrahigh ġeneralment użat (50-200W), li jista' jarmu varjetà ta 'wavelengths ta' dawl, iżda kull materjal fluworexxenti għandu wavelength ta 'eċitazzjoni tal-fluworexxenza l-aktar b'saħħitha, għalhekk il-ħtieġa li żżid filtri ta' eċċitazzjoni (ġeneralment filtru ta 'eċitazzjoni ultravjola, vjola, blu u aħdar), sabiex biss ċertu wavelength ta' dawl ta 'eċitazzjoni permezz tal-irradjazzjoni ta' kampjuni, filwaqt li d-dawl l-ieħor jiġi assorbit. Għalhekk huwa meħtieġ li żżid filtru ta 'eċitazzjoni (ġeneralment filtri ta' eċċitazzjoni ultravjola, vjola, blu u aħdar), sabiex biss ċertu wavelength ta 'dawl ta' eċċitazzjoni permezz tal-kampjun, filwaqt li dawl ieħor jiġi assorbit. Meta kull sustanza tiġi irradjata b'dawl ta 'eċitazzjoni, temetti fluworexxenza viżibbli ta' wavelength itwal minn dik tad-dawl irradjat fi żmien qasir ħafna. Il-fluworexxenza għandha speċifiċità, ġeneralment aktar dgħajfa mid-dawl ta 'eċitazzjoni, sabiex tkun tista' tosserva l-fluworexxenza speċifika, il-lenti oġġettiva wara l-ħtieġa li żżid imblukkar (jew soppressjoni) trid tintgħażel biex tużah.
Mikroskopju ta 'fluworexxenza u differenza ta' mikroskopju ordinarju
1. Il-metodu ta 'illuminazzjoni huwa ġeneralment jaqa', jiġifieri, is-sors tad-dawl huwa proġettat fuq il-kampjun permezz tal-lenti oġġettiva;
2. Is-sors tad-dawl huwa dawl ultravjola, b'wavelength iqsar u qawwa ta 'riżoluzzjoni ogħla minn mikroskopji ordinarji;
3. Hemm żewġ filtri speċjali, dak quddiem is-sors tad-dawl jintuża biex jiffiltra d-dawl viżibbli, u dak bejn l-ocular u l-lenti oġġettiva jintuża biex jiffiltra d-dawl ultravjola biex jipproteġi l-għajn tal-bniedem.
Il-mikroskopju tal-fluworexxenza huwa wkoll tip ta 'mikroskopju ottiku, id-differenza ewlenija hija li l-wavelength ta' eċċitazzjoni tat-tnejn huma differenti. Dan jiddetermina l-mikroskopju tal-fluworexxenza u l-istruttura tal-mikroskopju ottiku ordinarju u l-użu ta 'metodi differenti.
Il-mikroskopju tal-fluworexxenza huwa l-għodda bażika għaċ-ċitokimika tal-immunofluworexxenza. Huwa magħmul minn sors tad-dawl, sistema ta 'pjanċa tal-filtru u sistema ottika u komponenti ewlenin oħra. Juża ċertu wavelength ta 'dawl biex jistimula l-kampjun biex jarmu fluworexxenza, li hija eżaltata permezz tal-lenti oġġettiva u s-sistema ta' l-għajnejn biex tosserva l-immaġni fluworexxenti tal-kampjun.
