Differenzi bejn il-mikroskopija tal-fluworexxenza u l-mikroskopija konfokali
Mikroskopju tal-fluworexxenza
1. Il-mikroskopju tal-fluworexxenza juża dawl ultravjola bħala sors tad-dawl biex jirradja l-oġġett li qed jiġi spezzjonat, u jikkawża li jarmi l-fluworexxenza, u mbagħad josserva l-forma u l-pożizzjoni tal-oġġett taħt il-mikroskopju. Mikroskopija tal-fluworexxenza tintuża biex tistudja l-assorbiment, it-trasport, id-distribuzzjoni, u l-lokalizzazzjoni ta 'sustanzi fiċ-ċelloli. Xi sustanzi fiċ-ċelloli, bħall-klorofilla, jistgħu joħorġu meta jkunu esposti għal radjazzjoni ultravjola; Hemm ukoll xi sustanzi li ma jistgħux jarmu l-fluworexxenza huma stess, iżda jistgħu wkoll jarmu l-fluworexxenza jekk imtebba 'b'żebgħat fluworexxenti jew antikorpi fluworexxenti u irradjati bid-dawl ultravjola. Il-mikroskopija tal-fluworexxenza hija waħda mill-għodod għal riċerka kwalitattiva u kwantitattiva fuq dawn is-sustanzi.
2. Prinċipju tal-mikroskopju tal-fluworexxenza:
(A) Sors tad-dawl: Is-sors tad-dawl jarmi dawl ta 'diversi tulijiet ta' mewġ (minn ultravjola għal infra-aħmar).
(B) Sors tad-dawl tal-filtru tal-eċċitazzjoni: Trasmissjoni tad-dawl ta 'tul ta' mewġa speċifiku li jista 'jikkawża fluworexxenza fil-kampjun, filwaqt li jimblokka d-dawl li huwa inutli għal fluworexxenza eċċitanti.
(C) Kampjuni fluworexxenti: Normalment imtebba 'bi pigmenti fluworexxenti.
(D) Filtru tal-imblukkar: jittrasmetti b'mod selettiv il-fluworexxenza billi jimblokka d-dawl ta 'eċċitazzjoni li mhux assorbit mill-kampjun, u xi tulijiet ta' mewġ fil-fluworexxenza huma wkoll trasmessi b'mod selettiv. Mikroskopju li juża dawl ultravjola bħala sors tad-dawl biex jagħmel l-oġġett imdawwal jarmi l-fluworexxenza. Il-mikroskopju elettroniku ġie mmuntat għall-ewwel darba minn Knorr u Haruska f'Berlin, il-Ġermanja fl-1931. Dan il-mikroskopju juża raġġi ta 'elettroni b'veloċità għolja minflok travi tad-dawl. Minħabba t-tul tal-mewġa ferm iqsar tal-fluss tal-elettroni meta mqabbel mal-mewġ tad-dawl, l-ingrandiment ta 'mikroskopju elettroniku jista' jilħaq 8 0 0000 darbiet, b'limitu ta 'riżoluzzjoni minima ta' 0.2 nanometri. L-iskannjar tal-mikroskopju elettroniku, li ntuża l-ewwel fl-1963, jippermetti lin-nies jaraw l-istrutturi ċkejkna fuq il-wiċċ tal-oġġetti.
3. Skop ta 'Applikazzjoni: Użat biex tkabbar immaġini ta' oġġetti żgħar. Ġeneralment użat għall-osservazzjonijiet tal-bijoloġija, il-mediċina, partiċelli mikroskopiċi, eċċ.
Mikroskopju Konfokali
1. Il-mikroskopju konfokali jżid nofs lenti riflessiva mal-passaġġ tad-dawl rifless, li jiddevja d-dawl rifless li għadda mil-lenti f'direzzjonijiet oħra. Fil-punt fokali tagħha, hemm baffle b'pinhole li jinsab fil-punt fokali, u wara l-baffle hemm tubu fotomultiplier. Jista 'jkun immaġinat li d-dawl rifless qabel u wara l-fokus tad-dawl ta' skoperta ma jistax ikun iffokat fuq it-toqba żgħira minn din is-sistema konfokali u se jkun imblukkat mill-baffle. Allura l-fotometru jkejjel l-intensità tad-dawl riflessa fil-punt fokali.
2. Prinċipju: Mikroskopi ottiċi tradizzjonali jużaw sorsi tad-dawl tal-kamp, u l-immaġni ta 'kull punt fuq il-kampjun hija affettwata minn diffrazzjoni jew dawl imxerred minn punti ġirien; Il-mikroskopju konfokali tal-iskannjar bil-lejżer juża raġġ tal-lejżer biex idawwal pinhole u jifforma sors tad-dawl tal-punt biex jiskennja kull punt fuq il-pjan fokali tal-kampjun. Il-punt imdawwal fuq il-kampjun huwa immaġinat fil-pinhole ta 'skoperta, u huwa riċevut punt b'punt jew linja minn tubu fotomultiplier (PMT) jew apparat ta' akkoppjar kiesaħ (CCCD) wara li jinstab il-pinhole, li jifforma malajr immaġni ta 'fluworexxenza fuq l-iskrin tal-monitor tal-kompjuter. Il-pinhole tal-illuminazzjoni u l-pinhole tad-detezzjoni huma konjugati relattivament mal-pjan fokali tal-lenti oġġettiva. Il-punti fuq il-pjan fokali huma ffokati fl-istess ħin fuq il-pinhole tal-illuminazzjoni u l-pinhole tal-emissjoni, u l-punti barra l-pjan fokali ma jiġux immaġinati fil-pinhole tal-iskoperta. L-immaġni konfokali li tirriżulta hija s-sezzjoni trasversali ottika tal-kampjun, li tingħeleb l-iżvantaġġ ta 'immaġini mċajpra fil-mikroskopi ġenerali.
