Differenza bejn mikroskopju fluworexxenti u mikroskopju konfokali tal-lejżer
mikroskopju fluworexxenti
1. Il-mikroskopju tal-fluworexxenza juża dawl ultravjola bħala s-sors tad-dawl, li jintuża biex irradja l-oġġett misjub biex jagħmilha jarmu fluworexxenza, u mbagħad josserva l-forma u l-pożizzjoni tal-oġġett taħt il-mikroskopju. Il-mikroskopju tal-fluworexxenza jintuża biex jistudja l-assorbiment, it-trasport, id-distribuzzjoni u l-post tas-sustanzi kimiċi fiċ-ċelloli. Xi sustanzi fiċ-ċelloli, bħall-klorofilla, jistgħu jiffluworexxew wara li jiġu irradjati minn raġġi ultravjola; Sustanzi oħra ma jistgħux jiffluworexxew waħedhom, iżda jistgħu jiffluworexxew wara li jkunu miżbugħin b'żebgħat fluworexxenti jew antikorpi fluworexxenti u irradjati minn raġġi ultravjola. Il-mikroskopju tal-fluworexxenza huwa wieħed mill-għodod għar-riċerka kwalitattiva u kwantitattiva dwar dawn is-sustanzi.
2, prinċipju tal-mikroskopju fluworexxenti:
(a) Sors tad-dawl: Is-sors tad-dawl jirradja dawl ta 'wavelengths varji (minn ultravjola għal infra-aħmar).
(b) Sors tad-dawl tal-filtru tal-eċċitazzjoni: dawl li jittrasmetti b'tul ta 'mewġ speċifiku li jista' jagħmel il-kampjun jiffluworexxenti, filwaqt li jimblokka d-dawl li huwa inutli għall-fluworexxenza tal-eċċitazzjoni.
(c) Kampjuni fluworexxenti: ġeneralment imtebbgħin b'pigmenti fluworexxenti.
(d) Filtru li jimblokka: dawl ta 'eċċitazzjoni li jimblokka mhux assorbit mill-kampjun biex jittrasmetti b'mod selettiv il-fluworexxenza, u xi wavelengths fil-fluworexxenza huma wkoll trasmessi b'mod selettiv. Mikroskopju li juża dawl ultravjola bħala s-sors tad-dawl biex jagħmel l-oġġett irradjat jarmu fluworexxenza. Il-mikroskopju elettroniku ġie mmuntat għall-ewwel darba minn Knohl u Ha Roska f'Berlin fl-1931. Dan il-mikroskopju juża raġġ ta 'elettroni ta' veloċità għolja minflok raġġ tad-dawl. Minħabba li l-wavelength tal-fluss tal-elettroni huwa ħafna iqsar minn dak tal-mewġ tad-dawl, l-ingrandiment tal-mikroskopju elettroniku jista 'jilħaq 800 elf darba, u l-limitu minimu ta' riżoluzzjoni huwa 0.2 nanometru. Il-mikroskopju elettroniku tal-iskannjar, li beda jintuża fl-1963, jista 'jġiegħel lin-nies jaraw l-istrutturi ċkejkna fuq il-wiċċ tal-oġġetti.
3. Skop ta 'applikazzjoni: użat biex tkabbar l-immaġni ta' oġġetti ċkejkna. Huwa ġeneralment applikat għall-osservazzjoni tal-bijoloġija, mediċina u partiċelli mikroskopiċi.
Mikroskopju konfokali
1. Mikroskopju konfokali jżid semi-lenti semi-riflettiva fuq il-mogħdija ottika tad-dawl rifless, li jirrifratta d-dawl rifless li jkun għadda mill-lenti għal direzzjonijiet oħra. Fil-fokus tiegħu, hemm baffle bi pinhole, u l-pinhole jinsab fil-fokus. Wara l-baffle hemm tubu fotomultiplikatur. Jista 'jiġi immaġina li d-dawl rifless qabel u wara l-fokus tad-dawl ta' skoperta jgħaddi minn din is-sistema konfokali, u mhux se jkun iffukat fuq it-toqba żgħira, iżda se jkun imblukkat mill-baffle. Allura l-fotometru jkejjel l-intensità tad-dawl rifless fil-fokus.
2. Prinċipju: Il-mikroskopju ottiku tradizzjonali juża s-sors tad-dawl tal-kamp, u l-immaġni ta 'kull punt fuq il-kampjun se tkun interferita mid-diffrazzjoni jew dawl imxerred tal-punti ta' ħdejn xulxin; Il-mikroskopju konfokali tal-iskannjar tal-lejżer jiskenja kull punt tal-pjan fokali fil-kampjun billi juża s-sors tad-dawl tal-punt iffurmat mir-raġġ tal-lejżer li jgħaddi mill-pinhole tal-illuminazzjoni. Il-punt irradjat fuq il-kampjun huwa immaġini fil-pinhole ta 'skoperta, li jiġi riċevut punt b'punt jew linja b'punt b'tubu fotomultiplikat (PMT) jew apparat cold-coupled (cCCD) wara li jinstab il-pinhole, u immaġni fluworexxenti hija ffurmata malajr fuq l-iskrin tal-monitor tal-kompjuter. Il-pinhole ta 'l-illuminazzjoni u l-pinhole ta' skoperta huma konjugati fir-rigward tal-pjan fokali tal-lenti oġġettiva, u l-punti fuq il-pjan fokali jiffokaw fuq il-pinhole ta 'l-illuminazzjoni u l-pinhole ta' emissjoni fl-istess ħin, u l-punti barra l-pjan fokali mhux se jiġu immaġini fil-pinhole ta 'skoperta, sabiex l-immaġni konfokali miksuba tkun is-sezzjoni trasversali ottika tal-kampjun, li tegħleb id-difett ta' immaġni mċajpra tal-mikroskopju komuni.
3. Oqsma ta 'applikazzjoni: li jinvolvu mediċina, riċerka fuq annimali u pjanti, bijokimika, batterjoloġija, bijoloġija taċ-ċelluli, tessut u embrijun, xjenza tal-ikel, ġenetika, farmakoloġija, fiżjoloġija, ottika, patoloġija, botanika, newroxjenza, bijoloġija tal-baħar, xjenza tal-materjali, xjenza elettronika, mekkanika, ġeoloġija taż-żejt u mineraloġija.
