Determinazzjoni tan-numru ta 'mikro-organiżmi-Metodu mikroskopiku ta' għadd dirett!
It-tkabbir tal-popolazzjoni batterjali huwa manifestat minn żieda fin-numru taċ-ċelluli jew żieda fil-materjal ċellulari. Metodi biex jiġi ddeterminat in-numru ta 'ċelluli jinkludu għadd mikroskopiku dirett, għadd tal-pjanċi, stima tat-turbidità permezz ta' spettrofotometru, numru l-aktar probabbli MPN u filtrazzjoni tal-membrana. (filtrazzjoni tal-membrana) eċċ. Metodi għall-kejl tas-sustanzi ċellulari jinkludu d-determinazzjoni tal-piż xott taċ-ċelluli, id-determinazzjoni ta 'ċerti komponenti taċ-ċelluli bħal kontenut ta' nitroġenu, RNA u kontenut ta 'DNA, u determinazzjoni ta' prodotti metaboliti. Fil-qosor, hemm ħafna metodi għall-kejl tat-tkabbir mikrobjali, kull wieħed bil-vantaġġi u l-iżvantaġġi tiegħu. Il-metodu għandu jintgħażel skont ir-rekwiżiti speċifiċi tax-xogħol. Dan l-esperiment prinċipalment jintroduċi l-metodu ta ' l-għadd dirett tal-mikroskopju li huwa komunement użat fil-produzzjoni u xogħol ta ' riċerka xjentifika.
1. Rekwiżiti għan
1. Iċċara l-prinċipju tal-għadd b'bord tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm.
2. Ikkontrolla l-metodu tal-għadd tal-mikro-organiżmi bl-użu ta 'bord tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm.
2. Prinċipji bażiċi
Il-metodu ta 'għadd dirett tal-mikroskopju huwa metodu sempliċi, veloċi u intuwittiv li jpoġġi ammont żgħir ta' sospensjoni tal-kampjun biex jiġi ttestjat fuq slide speċjali b'erja u volum determinati (imsejħa wkoll batterjometru) u jgħoddha direttament taħt mikroskopju. Metodi. Bħalissa, batterometriċi użati b'mod komuni fid-dar u barra jinkludu: emoċitometru, batterjometru Peteroff-Hauser, u batterjometru Hawksley, eċċ Dawn kollha jistgħu jintużaw biex jgħoddu l-ħmira, batterji, spori tal-moffa u sospensjonijiet oħra, u l-prinċipji bażiċi huma l-istess. L-aħħar żewġ counters batterjali għandhom volum totali ta '0.02mm3 wara li jkunu mgħottijin b'għatu tal-ħġieġ, u d-distanza bejn il-ħġieġa tal-kopertura u l-islajd hija biss 0.02mm. Għalhekk, lenti oġġettiva ta 'immersjoni taż-żejt tista' tintuża biex tosserva u tiskopri ċelloli iżgħar bħal batterji. għadd. Minbarra l-użu ta 'dawn il-batterometri, hemm ukoll metodu ta' stima li josserva direttament il-proporzjon taż-żona smear mal-erja tal-kamp viżiv taħt mikroskopju. Dan il-metodu huwa ġeneralment użat għall-eżami batterjoloġiku tal-ħalib. Il-vantaġġi tal-metodu tal-għadd dirett tal-mikroskopju huma li huwa intuwittiv, veloċi u faċli biex topera. Madankollu, l-iżvantaġġ ta 'dan il-metodu huwa li r-riżultat imkejjel huwa ġeneralment is-somma ta' batterji mejta u batterji ħajjin. Bħalissa hemm xi metodi biex jingħelbu dan in-nuqqas, bħall-kombinazzjoni ta 'batterji vijabbli li jtebgħu l-kultura tal-mikrochamber (ħin qasir) u żżid inibituri tad-diviżjoni taċ-ċelluli biex jinkiseb l-iskop li jingħaddu biss batterji vijabbli.
Dan l-esperiment juża emoċitometru bħala eżempju biex iwettaq għadd dirett taħt mikroskopju. Għall-użu taż-żewġ batterometri l-oħra, jekk jogħġbok irreferi għall-istruzzjonijiet ta 'kull manifattur. L-għadd dirett taħt mikroskopju bl-użu ta 'emoċitometru huwa metodu ta' enumerazzjoni mikrobjali użat komunement. Il-bord tal-għadd huwa slide speċjali b'erba 'skanalaturi li jiffurmaw tliet pjattaformi; il-pjattaforma usa 'fin-nofs hija maqsuma f'żewġ nofsijiet b'kanal orizzontali qasir, u hemm grilja tal-grilja fuq kull naħa tal-pjattaforma. Kull grilja kwadra hija maqsuma f'disa 'kwadri kbar, u l-kwadru kbir fin-nofs huwa l-kamra tal-għadd. L-istruttura tal-bord tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm tidher fil-Figura {{0}}. Ġeneralment hemm żewġ speċifikazzjonijiet għall-iskala tal-kamra tal-għadd. Wieħed huwa kwadru kbir maqsum f'25 kwadru medju, u kull kwadru medju huwa maqsum f'16-il kwadru żgħir (Figura 15-2); l-ieħor huwa kwadru kbir. Il-gradilja kwadra hija maqsuma f'16-il kwadru medju, u kull kwadru medju huwa maqsum f'25 kwadru żgħir. Madankollu, tkun xi tkun it-tip ta' bord tal-għadd, hemm 400 kwadri żgħar f'kull kwadru kbir. It-tul tal-ġenb ta 'kull kwadru kbir huwa lmm, allura l-erja ta' kull kwadru kbir hija lmm2. Wara li l-cover slip tkun koperta, l-għoli bejn il-cover slip u l-slide huwa 0.lmm, għalhekk il-volum tal-kamra tal-għadd huwa 0.lmm3 (għaxar elf ta 'millilitru). Figura 15-1 Struttura tal-bord tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm (1) Figura 15-2 Struttura tal-bord tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm (2) A. Dehra ta 'quddiem; B. Sezzjoni lonġitudinali; grilja kwadra mkabbra, il-kwadru kbir fin-nofs huwa l-kamra tal-għadd 1. Bord tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm; 2. Cover slip; 3. Meta tgħodd fil-kamra tal-għadd, ġeneralment għodd in-numru totali ta 'batterji f'ħames kwadri, imbagħad sib il-valur medju ta' kull kwadru, u mbagħad immoltiplika b'25 jew 16 biex tikseb In-numru totali ta 'batterji fi kwadru kbir imbagħad jiġi kkonvertit fin-numru totali ta 'batterji f'1ml ta' soluzzjoni batterjali. Ejja ngħidu li n-numru totali ta 'batterji fil-ħames kwadri tan-nofs huwa A, u l-fattur ta' dilwizzjoni tas-soluzzjoni batterjali huwa B. Jekk hija pjanċa tal-għadd b'25 kwadri tan-nofs, allura n-numru totali ta 'batterji f'1mL tas-soluzzjoni batterjali {{ 23}} A/5×25×104× B=50000A·B (biċċiet) Bl-istess mod, jekk tkun pjanċa tal-għadd b'16-il kwadru, in-numru totali ta' batterji f'1mL ta' soluzzjoni batterjali {{ 30}}A/5×16×104×B=32000A·B (biċċiet),,
