Determinazzjoni tal-popolazzjoni mikroskopika - metodu ta 'għadd mikroskopiku dirett!
I. Rekwiżiti ta' Għan
1, Biex tiċċara l-prinċipju tal-għadd tal-pjanċa tal-ematokrit.
2, Ikkontrolla l-metodu tal-għadd tal-mikrobi bl-użu tal-pjanċa tal-ematokrit.
II. Prinċipji bażiċi
Il-metodu tal-għadd dirett tal-mikroskopju huwa ammont żgħir ta 'sospensjoni tal-kampjun li għandu jiġi ttestjat fuq slide speċjali b'erja u volum definiti (magħruf ukoll bħala l-counter batterjoloġiku), fil-mikroskopju jgħodd direttament metodu sempliċi, rapidu u intuwittiv. Fil-preżent, counters batterjoloġiċi domestiċi u barranin użati komunement huma: pjanċa tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm, counters batterjoloġiċi Peteroff-Hauser u counters batterjoloġiċi Hawksley, eċċ., Li jistgħu jintużaw għall-ħmira, batterji, spori tal-moffa u sospensjonijiet oħra tal-għadd, il-prinċipju bażiku huwa l-istess. L-aħħar żewġ tipi ta 'bankijiet għandhom volum totali ta' 0.02mm3 wara li titpoġġa l-coverslip, u d-distanza bejn il-coverslip u l-porzjon trasportatur hija biss 0.02mm, għalhekk ċelloli iżgħar bħal batterji jistgħu jiġu osservati u magħduda b'għan ta 'immersjoni taż-żejt. Minbarra l-użu ta 'dawn il-counters, hemm ukoll metodu ta' stima tal-proporzjon ta 'żona ta' smear għal żona tal-kamp viżiv osservat direttament taħt il-mikroskopju, li ġeneralment jintuża għal eżami batterjoloġiku tal-ħalib tal-baqra. Il-vantaġġi tal-metodu tal-għadd tal-mikroskopju dirett huma intuwittivi, rapidi u faċli biex joperaw. Madankollu, l-iżvantaġġ ta 'dan il-metodu huwa li r-riżultat huwa normalment is-somma ta' organiżmi mejta u ħajjin. Hemm xi metodi biex jingħelbu dan l-iżvantaġġ, bħall-kombinazzjoni ta 'mikrochamber kultura mtebbgħin batterji ħajjin (ħin qasir) u ż-żieda ta' inibituri taċ-ċitokinesi biex jinkiseb l-iskop li jingħaddu biss organiżmi ħajjin.
Passi tal-operazzjoni
1, Preparazzjoni ta 'sospensjoni batterjali
Uża salina sterili biex tagħmel sospensjoni batterjali tal-ħmira tal-birra b'konċentrazzjoni xierqa.
2, kamra tal-għadd tal-mera
Qabel ma żżid il-kampjuni, il-kamra tal-għadd tal-pjanċa tal-għadd għandha tiġi spezzjonata l-ewwel. Jekk ikun hemm xi ħmieġ, jeħtieġ li jitnaddaf u jinxef qabel ma jingħadd.
3, Żieda ta 'kampjuni
Naddaf u nixxef pjanċa tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm miksija bi coverslip, u mbagħad uża buretta kapillari sterili biex tħawwad is-sospensjoni tal-ħmira tal-birra mit-tarf tal-coverslip biex tinżel qatra żgħira, sabiex il-likwidu batterjali tul il-vojt permezz ta 'penetrazzjoni kapillari fil- kamra tal-għadd awtomatikament, ġeneralment il-kamra tal-għadd tista 'timtela b'likwidu batterjali. Meta jittieħdu kampjuni, is-soluzzjoni batterjali għandha titħawwad sew l-ewwel; meta żżid kampjuni, il-kamra tal-għadd m'għandux ikollha bżieżaq tal-arja.
4, Għadd tal-mikroskopju
Wara li żżid il-kampjun, ħalliha tistrieħ għal 5min, imbagħad poġġi l-pjanċa tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm fuq l-istadju tal-ġarr tal-mikroskopju, l-ewwel sib il-post tal-kamra tal-għadd b'ingrandiment baxx, u mbagħad ibdelha għal ingrandiment għoli għall-għadd. Aġġusta l-intensità tad-dawl tal-mikroskopju b'mod xieraq, għall-mikroskopju b'dawl riflettur għandu wkoll jagħti attenzjoni lid-dawl m'għandux ikun preġudikat fuq naħa waħda, inkella l-kamp viżwali ma jkunx faċli biex ilsien ċar għadd kamra grilja linja, jew ara biss il-linja vertikali jew ara biss il-linja orizzontali. Jekk il-likwidu batterjali jinstab li huwa oħxon wisq jew irqiq wisq qabel l-għadd, huwa meħtieġ li terġa 'taġġusta d-dilwizzjoni qabel l-għadd. Rekwiżiti ġenerali ta' dilwizzjoni tal-kampjuni ta' madwar 5 sa 10 batterji f'kull ċellula huma xierqa. Għal kull kamra tal-għadd, l-organiżmi f'5 kompartimenti tan-nofs (4 kantunieri u kompartiment wieħed tan-nofs fiċ-ċentru) jintgħażlu għall-għadd. L-organiżmi li jinsabu fuq il-linji tal-grilja normalment jingħaddu biss fuq il-linji ta 'fuq u tal-lemin. Fil-każ tal-ħmira tal-ħmira, meta l-ġisem tal-ħmira jilħaq nofs id-daqs taċ-ċellula omm, jingħadd bħala żewġ organiżmi. Għadd ta' kampjun miż-żewġ kmamar tal-għadd fil-valur medju biex jiġi kkalkulat il-kontenut batterjali tal-kampjun.
5. Tindif tal-pjanċa tal-ematokrit
Wara l-użu, laħlaħ il-pjanċa tal-għadd taċ-ċelluli tad-demm bl-ilma taħt il-vit, tużax oġġetti iebsin biex taħsel u xkupilja, nixxefha waħdek jew uża hair dryer biex tinxef wara l-ħasil. Spezzjona mikroskopikament il-pjanċa biex tara jekk hemmx xi organiżmi residwi jew preċipitati oħra f'kull kompartiment. Jekk ma jkunx nadif, il-ħasil għandu jiġi ripetut sakemm ikun nadif.
