Iddeskrivi fid-dettall il-passi tal-għażla u l-metodi ta 'sondi fluworexxenti għall-mikroskopija konfokali
F'esperimenti b'mikroskopji konfokali, xi indikaturi sperimentali jistgħu jiġu skoperti bl-użu tal-awtofluworexxenza tal-kampjun innifsu jew sustanzi eżoġeni, iżda ħafna mis-sustanzi li għandhom jiġu ttestjati m'għandhomx fluworexxenza li tista 'titkejjel u jeħtieġ li jiġu ttikkettjati b'sondi fluworexxenti. Għandu sinjal fluworexxenti li jista 'jitkejjel. Allura, kif tagħżel sondi fluworexxenti għall-mikroskopija konfokali?
1. Iddetermina l-indikaturi li għandhom jiġu ttestjati skont l-iskop tal-esperiment
Ladarba jiġi ddeterminat l-indiċi ta' skoperta, tiġi determinata wkoll il-firxa tal-għażla tas-sondi fluworexxenti. Jista 'jidher li l-għażla ta' liema sonda fluworexxenti tuża fl-esperiment hija determinata mill-iskop tal-esperiment. Pereżempju, jekk l-iskop tal-esperiment huwa li jistudja l-bidliet tal-jonji tal-kalċju fil-kardjomijoċiti meta sseħħ fibrillazzjoni atrijali, jista 'jiġi determinat li s-sustanza li għandha tiġi ttestjata hija joni tal-kalċju fil-kardjomijoċiti, u l-firxa tal-għażla ta' sondi fluworexxenti hija limitata għal sondi tal-jone tal-kalċju li jistgħu jittikkettjaw ċelloli ħajjin. Labra.
2. Iddetermina l-firxa ta 'sondi fluworexxenti disponibbli
Għal sustanzi jew indikaturi sperimentali ġodda, jekk l-iskop tal-esperiment mhuwiex li jesplora sondi fluworexxenti ġodda, tista 'tagħżel li tapplika sondi maturi u metodi ta' tikkettjar. It-tip jew il-firxa ta 'sondi fluworexxenti li jistgħu jittikkettaw is-sustanza li għandha tiġi ttestjata tista' tiġi determinata billi ssir tfittxija ta 'letteratura awtorevoli jew katalgi ta' prodotti ta 'kumpaniji tar-reaġenti magħrufa sew f'pajjiżhom kif ukoll barra.
3. Investiga jekk il-karatteristiċi tas-sonda fluworexxenti jissodisfawx ir-rekwiżiti għall-preparazzjoni ta 'kampjuni fluworexxenti
Il-karatteristiċi tas-sondi fluworexxenti jaffettwaw direttament it-tikkettar tal-kampjuni u r-riżultati sperimentali. Għalhekk, qabel ma tagħżel sondi fluworexxenti u tikkettjar kampjuni fl-esperiment, huwa meħtieġ li jifhmu bis-sħiħ il-karatteristiċi tal-fluworexxenza tagħhom. Il-karatteristiċi tas-sondi fluworexxenti li għandhom jiġu investigati jinkludu:
1. Karatteristiċi ta 'reazzjoni ta' sondi tad-dawl u kampjuni
2. Sensittività u intensità tal-fluworexxenza ta 'sondi fluworexxenti
3. Proprjetajiet spettrali ta' kampjuni ttikkettjati b'sondi fluworexxenti
4. Stabbiltà tal-fluworexxenza
5. Interazzjoni bejn fluworexxenza multipla fil-kampjun
