Mikroskopija bijoloġika mwettqa fuq il-volum tal-blokki tat-tessuti
Mikroskopji bijoloġiċi Mikroskopji b'kondensatur jistgħu jċaqalqu l-kondensatur 'il fuq u 'l isfel biex il-luminożità tiegħu tkun moderata, u wkoll jistgħu jibdlu l-apertura tal-elaborazzjoni tad-dawl varjabbli sabiex tinkiseb luminożità moderata 9b. Jekk id-dawl ikun xemxi, il-kondensatur jista 'jitmexxa 'l fuq u l-apertura tad-dawl varjabbli tista' titkabbar. Jekk id-dawl huwa qawwi wisq, allura l-mera spotlight tista 'tkun xierqa isfel, l-apertura tal-qabża tad-dawl varjabbli għal tnaqqis xieraq. Jekk f'dan il-każ xorta tħossok blinding, allura inti tista 'tagħżel il-filtru xieraq imqiegħed fil-parentesi taħt l-attenzjoni. Dan jista 'jinkiseb biex tagħmel inti sodisfatt bil-luminożità. Naturalment, fl-aġġustament tal-pożizzjonijiet ta 'fuq u t'isfel tal-lenti tal-kondensatur jista' jvarja d-daqs tal-apertura tal-qari tad-dawl u l-għażla ta 'filtri xierqa, jiġifieri wara ċertu perjodu ta' prattika u esperjenza.
Mikroskopju bijoloġiku Kwistjoni importanti ħafna hija fil-proċess tat-teħid tal-kampjuni u s-separazzjoni taċ-ċelloli, it-tnixxif bil-friża u l-inkorporazzjoni tar-reżina (FD) wara l-iffriżar ta 'fuljetti ultra, it-tnixxif bil-friża wara l-ġirja fina ta' kull parti tal-kontenut tal-kompożizzjoni elementali 65 għandu jkun mmaniġġjati b'attenzjoni kbira, u m'għandhomx jagħmlu ħsara liċ-ċelloli li għandhom jiġu osservati u analizzati. Minħabba li l-analiżi tal-mikro-żona tar-raġġi-x mhix biss ħafna passi, u l-ispiża hija għolja ħafna, jekk wara żmien twil u passi multipli ta 'proċessar, iċ-ċelluli analizzati huma ċelluli bil-ħsara jew ċelluli mejta, biex tiġbed konklużjonijiet żbaljati huwa ta' dispjaċir ħafna. Pereżempju, il-kardjomijoċiti iżolati mit-trattament tal-collagenase għandhom żewġ morfoloġiji, waħda hija forma ta 'virga twila u l-oħra hija tonda. Dawn tal-aħħar huma ċelluli li qed imutu li ġew imħassra matul il-proċess tal-iżolament taċ-ċelluli.
Mikroskopju bijoloġiku Il-myofibre jista 'jitqiegħed fuq xtilliera speċjali, sabiex il-kontrazzjoni ta' din il-myofibre tilħaq ċertu fażi ta 'żmien meta jeħtieġ li tiġi ffissata, u mbagħad immedjatament tattiva ż-żennuna, sabiex il-propan likwidu jiġi sprejjat mal-myofibre, sabiex huwa mkessaħ u kiesaħ iffissat. Imbagħad il-fibra tal-muskoli tinħareġ flimkien mar-rack u titqiegħed f'nitroġenu likwidu. Jekk iffissar ċelluli tad-demm jew ċelluli iżolati, l-ewwel ċentrifugazzjoni b'veloċità baxxa biex jagħmlu ċ-ċelloli kkonċentrati, iċ-ċelloli se jiġu trasferiti għal konduttività termali tajba tat-tubu tal-fidda, it-tubu fil-karkassa tal-propan likwidu ffissat kiesaħ. Laboratorju tas-sala frixa tal-firien fiss, l-ewwel żewġ biċċiet ta 'l-azzar b'elju likwidu (jew nitroġenu likwidu) tkessiħ minn qabel, b'morsa kklampjata ż-żewġ biċċiet tar-ram se jitqiegħdu quddiem u wara l-frixa, sabiex iż-zija tal- iffissar kiesaħ tat-tifi tal-glandola. It-tessuti jew iċ-ċelloli jistgħu jinħażnu għal żmien twil billi jiġu trasferiti f'nitroġenu likwidu wara t-tifi u l-iffissar.
Bijomikroskopija Minbarra l-metodu * promoss * bħalissa ta 'sezzjonijiet ultrarqaq iffriżati, teknika ta' depożizzjoni oħra użata mix-xjenzati hija deskritta hawn. Sustanza tiżdied qabel l-analiżi sabiex tifforma depożitu mal-komponent li jrid jiġi analizzat sabiex jiġi immobilizzat, u d-depożitu mbagħad jiġi analizzat. Per eżempju, oxalate u pyroantimonate huma komunement użati biex jiddepożitaw ca fil-mijoċiti; l-ewwel mhux sensittiv biżżejjed għal konċentrazzjonijiet baxxi ta 'ca fiċ-ċitoplasma; pyroantimonate għandu sensittività ogħla u jifforma depożiti densi elettronikament b'ca ħielsa fil-plażma, iżda pyroantimonate jifforma wkoll depożiti b'sodju, manganiż, barju u ħadid, li għandhom speċifiċità ifqar. Il-proċess tal-preparazzjoni tal-kampjun kien simili għal dak ta 'kampjuni ta' sezzjoni ultrathin ta 'mikroskopija elettronika ta' trażmissjoni ordinarja, bid-differenza li 3% piroantimonat tal-potassju (buffer tal-fosfat, pH 7.6) ġie ffissat għal 6 sigħat qabel l-iffissar, u fuq sezzjonijiet ultrathin mtebbgħin tal-muskolu, preċipitat iswed deher fil-linja tan-nofs tal-faxex A u 2 ta 'kull sezzjoni tal-mijonectomy, u mbagħad is-sezzjonijiet mhux imtebba ntużaw għall-analiżi ta' mikro-żona tar-raġġi X. Diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) intuża biex jippreċipita materjal li fih l-emoglobina, fost oħrajn. Dan it-tip ta 'reazzjoni ta' preċipitazzjoni ta 'l-istokimika u l-pont ta' mikro-żona tar-raġġi-x jistgħu jitqiesu li jintużaw f'laboratorji li m'għandhomx il-kundizzjoni ta 'sezzjonijiet ultra-rqaq iffriżati. L-għoli tal-quċċata tal-elementi li għandhom jiġu analizzati jistgħu jintużaw għal analiżi semi-kwantitattiva.
