Benefiċċji ta 'Avvanz tal-Mikroskopji Multiphoton tal-Iskanjar bil-Laser
Il-mikroskopju multifoton tal-iskannjar bil-lejżer huwa titjib sinifikanti tal-mikroskopija ottika, prinċipalment manifestat fil-kapaċità li tosserva strutturi profondi ta 'ċelluli ħajjin, ċelluli fissi, u tessuti, u tikseb strutturi ċari u li jaqtgħu multi-saff Z-pjan strutturi, jiġifieri slices ottiċi, li jistgħu jintużaw biex jinbnew strutturi solidi ta' kampjuni tri{{2}dimensjonali. Mikroskopju konfokali juża sors tad-dawl tal-lejżer, li huwa estiż biex jimla l-pjan fokali kollu tal-lenti oġġettiva, u mbagħad ikkonverġi f'punti żgħar ħafna fuq il-pjan fokali tal-kampjun permezz tas-sistema tal-lenti tal-lenti oġġettiva. Skont l-apertura numerika tal-lenti oġġettiva, id-dijametru tal-punt ta 'illuminazzjoni l-aktar qawwi huwa ta' madwar 0.25-0.8 μ m, u l-fond huwa ta 'madwar 0.5-1.5 μ m. Id-daqs tal-punt konfokali huwa determinat mid-disinn tal-mikroskopju, il-wavelength tal-lejżer, il-karatteristiċi oġġettivi, is-settings tal-istat tal-unità tal-iskannjar, u l-proprjetajiet tal-kampjun. Il-firxa ta 'illuminazzjoni u l-fond ta' mikroskopju tal-kamp huma kbar, filwaqt li l-illuminazzjoni ta 'mikroskopju konfokali hija ffokata fuq punt fokali sikur fuq il-pjan fokali. L-aktar vantaġġ bażiku tal-mikroskopija konfokali huwa li tista 'twettaq sezzjoni ottika fina fuq kampjuni fluworexxenti ħoxnin (sa 50 μ m jew aktar), bi ħxuna ta' bejn wieħed u ieħor 0.5 sa 1.5 μ m. Is-serje ta' immaġini slice ottiċi tista' tinkiseb billi l-kampjun jitmexxa 'l fuq u 'l isfel bl-użu tal-mutur stepper tal-assi Z-tal-mikroskopju. Il-ġbir ta' informazzjoni dwar l-immaġini huwa kkontrollat fi pjan sikur u mhux se jiġi mfixkel minn sinjali emessi minn postijiet oħra fuq il-kampjun. Wara li tneħħi l-influwenza tal-fluworexxenza fl-isfond u żżid il-proporzjon tas-sinjal għall-istorbju, il-kuntrast u r-riżoluzzjoni ta 'immaġini konfokali huma mtejba b'mod sinifikanti meta mqabbla ma' immaġini ta 'fluworexxenza ta' illuminazzjoni tal-kamp tradizzjonali. F'ħafna kampjuni, komponenti strutturali kkomplikati jingħaqdu biex jiffurmaw sistemi kumplessi, iżda ladarba jkunu jistgħu jinġabru biżżejjed sezzjonijiet ottiċi, nistgħu nużaw softwer biex nibnu mill-ġdid fi tliet dimensjonijiet. Dan il-metodu sperimentali intuża ħafna fir-riċerka bijoloġika biex jiċċara r-relazzjonijiet strutturali u funzjonali kumplessi bejn ċelloli jew tessuti.
